24小时热门版块排行榜    

查看: 993  |  回复: 8

87115wh

木虫 (小有名气)


[交流] 多抗制备问题

我想做一个多抗,自己纯化的重组蛋白带有GST标签,但是公司说不负责切标签,如果直接做,可能会有杂带,我想问下影响大吗?我也不知道自己的天然样本中是否含有和GST标签序列一样的蛋白。求各位大侠指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那就用把GST先除去好了,
2楼2013-03-08 09:32:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

87115wh

木虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2013-03-08 09:32:49
那就用把GST先除去好了,

怎么除去,能说的详细一点吗?实验室还没有切GST的酶
3楼2013-03-08 10:24:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 87115wh at 2013-03-08 10:24:29
怎么除去,能说的详细一点吗?实验室还没有切GST的酶...

用专门出GST标签的一种亲和介质纯化出去啊,
4楼2013-03-08 10:31:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无为书生

铁虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你做的是多抗,都是会有交叉反应的。
5楼2013-03-08 10:54:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

genda_cto

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
自然是有影响的.GST,一个26KD的蛋白,打到动物体内会产生大量针对GST的抗体。如果你的蛋白里面含有GST标签,那么你制备的抗血清、多抗用什么方法检测,用什么方法纯化?不过这些都可以解决,要纯化出针对你目的蛋白的単特异性多克隆抗体还是办得到的。但下一个问题,你以含有GST的目的蛋白作为免疫原,GST与目的蛋白几乎是等量的,能保证针对目的蛋白的抗体浓度和效价吗?这个就未知了。末了,问题出在哪,也就不得而知。
6楼2013-03-08 12:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

87115wh

木虫 (小有名气)


引用回帖:
6楼: Originally posted by genda_cto at 2013-03-08 12:41:16
自然是有影响的.GST,一个26KD的蛋白,打到动物体内会产生大量针对GST的抗体。如果你的蛋白里面含有GST标签,那么你制备的抗血清、多抗用什么方法检测,用什么方法纯化?不过这些都可以解决,要纯化出针对你目的蛋白 ...

汗,仁兄真乃神人也,说的话句句有理就是句句都没用。。
7楼2013-03-08 14:14:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

genda_cto

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 87115wh at 2013-03-08 14:14:24
汗,仁兄真乃神人也,说的话句句有理就是句句都没用。。...

这些问题我们公司都是可以解决的,鉴于涉及到技术服务的相关技术问题我只能给你提一个方向,具体怎么做就不好直接回答你了。如果一定要用GST标签,建议你切除纯化之后再用做免疫原,不过这个纯化会比较麻烦,而且切除成本很高。建议用His标签。鉴于只做免疫原,不涉及到活性问题,做无标签包涵体也是一个不错的选择。
8楼2013-03-11 10:31:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

407126867

铁虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by genda_cto at 2013-03-11 10:31:19
这些问题我们公司都是可以解决的,鉴于涉及到技术服务的相关技术问题我只能给你提一个方向,具体怎么做就不好直接回答你了。如果一定要用GST标签,建议你切除纯化之后再用做免疫原,不过这个纯化会比较麻烦,而且 ...

请问您,如果用His标签就不存在这些问题了吗?是His标签去掉比较容易,还是His标签本身不会引起机体产生抗原呢?谢谢,期待您的回复!
9楼2018-12-28 10:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 87115wh 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 招08考数学 +6 laoshidan 2026-03-20 14/700 2026-03-23 14:37 by 15614359529
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见