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西北胡杨

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 菌悬液的配制

做细菌吸附实验过程中,当考察某一个或几个影响因素时,会遇到菌悬液量不够用的情况。实验中配置的菌悬液是将离心后得到的细菌悬浮于100mL无菌水中,然后从该菌悬液中取一定体积到100或者200mL无菌水中,制得二次菌悬液。关于这种做法,各位虫子有更好的建议吗
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自己的事情,终究在于自己的态度。
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考拉003

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-03-07 20:10:51
西北胡杨: 金币+7 2013-03-09 07:57:09
不一定用离心后的菌体吧,可以在摇瓶中培养一批种子,按多浓度梯度稀释一下,就可以用了吧。一般菌悬液都需要稀释。就看你需要的菌体浓度多大了。
不是微生物专业的却进入微生物行业
2楼2013-03-07 15:03:44
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西北胡杨

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 考拉003 at 2013-03-07 15:03:44
不一定用离心后的菌体吧,可以在摇瓶中培养一批种子,按多浓度梯度稀释一下,就可以用了吧。一般菌悬液都需要稀释。就看你需要的菌体浓度多大了。

今天正在用平板法检测细菌数量。初次接触微生物,所以感觉比较吃力。呵呵
自己的事情,终究在于自己的态度。
3楼2013-03-07 16:04:59
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nacl1985

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西北胡杨: 金币+8 2013-03-09 07:57:31
不知道你说菌液量不够,具体是什么意思?
是不是可以尝试一下用国标测细菌含量的方法,来配制悬液呢?
比如你要配10^3个菌的菌液,用原菌液1:100稀释一下,如果10^3的菌液不够了,继续用原液稀释
这样只需要配少量的原液,就可制得大量所需浓度的菌液了
不知道是不是这个意思
4楼2013-03-07 22:31:59
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西北胡杨

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by nacl1985 at 2013-03-07 22:31:59
不知道你说菌液量不够,具体是什么意思?
是不是可以尝试一下用国标测细菌含量的方法,来配制悬液呢?
比如你要配10^3个菌的菌液,用原菌液1:100稀释一下,如果10^3的菌液不够了,继续用原液稀释
这样只需要配少 ...

嗯,是这个意思。不过每次所得的稀释液中细菌个数并不相同,甚至会相差很大。这一点也是自己比较困惑的地方。
自己的事情,终究在于自己的态度。
5楼2013-03-08 20:03:32
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jushuai

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西北胡杨: 金币+5 2013-03-09 07:57:37
像你所所说的,多少都有操作误差,在实验过程中是允许的!
6楼2013-03-08 21:55:21
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dodge1984

铁虫 (小有名气)

稀释不超过两次,每次稀释的最大倍数好像不能超过100倍,好像是这样
7楼2013-03-11 16:00:14
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西北胡杨

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by dodge1984 at 2013-03-11 16:00:14
稀释不超过两次,每次稀释的最大倍数好像不能超过100倍,好像是这样

嗯。我从原液中取1mL到100mL无菌水中,然后平板涂布得到这100mL无菌水中细菌的含量。但每次得到的菌落数差别较大,同时涂布也涂的不好,很多细菌都没有分散开。
自己的事情,终究在于自己的态度。
8楼2013-03-12 08:58:58
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