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甲基磺酸乙酯诱变
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| 请问各位甲基磺酸乙酯诱变时应该如何操作呢？加入5%硫代硫酸钠后是不是可以直接解毒使用了呢?还有是控制5%硫代硫酸钠的终浓度还是按多少比例加入5%硫代硫酸钠？希望各位能尽快帮帮忙，谢谢啦！ |
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【答案】应助回帖
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amisking(金币+3): 鼓励发帖交流。 2011-12-01 19:40:02
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EMS的诱变处理方法： ① EMS 母液的配制：为了安全和防上失效，配制前将需用的器皿，置冰箱内预冷，然后在冰浴中进行配制。取0.5ml EMS原液，加人到10 ml pH7.2磷酸缓冲液中，加盖，并轻轻转动试管。由于在水溶液中易失效，故尽可能低温保藏，并要现用现配。 ②取新鲜的菌体，经前培养至对数期．离心洗涤，用缓冲液制成8 ml菌悬液（107-108ml-1）。对于丝状菌孢子，则前培养至萌动期，悬液含 106 ml-1。 ③取EMS母液2ml，加人到以8ml的菌悬液中。在适宜温度下处理一定时间（根据预实验绪果确定）。处理的最终浓度为0 .lmol／L。对于真菌孢子，则为0.2-0.5rnol／L。 ④EMS处理一定时间后，用50倍生理盐水稀释或加入一定量的2%NaS2O3溶液或多次离心、洗涤，以终止反应。 EMS是剧毒的诱变剂，在整个诱变过程，包括配制药品、操作处理、保存等都要严守安全，不能接触皮肤，所有接触过EMS的器皿，单独用大量水冲洗洗涤，或用10％NaS2O3溶液浸泡过夜，再用清水冲洗干净。 |
2楼2011-12-01 13:13:14
3楼2011-12-03 14:38:54
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