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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 甲基磺酸乙酯诱变
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qinghua_lin

新虫 (初入文坛)

[求助] 甲基磺酸乙酯诱变

请问各位甲基磺酸乙酯诱变时应该如何操作呢？加入5%硫代硫酸钠后是不是可以直接解毒使用了呢?还有是控制5%硫代硫酸钠的终浓度还是按多少比例加入5%硫代硫酸钠？希望各位能尽快帮帮忙，谢谢啦！
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1楼 2011-12-01 10:25:18
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fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流。 2011-12-01 19:40:02
EMS的诱变处理方法：

① EMS 母液的配制：为了安全和防上失效，配制前将需用的器皿，置冰箱内预冷，然后在冰浴中进行配制。取0.5ml EMS原液，加人到10 ml pH7.2磷酸缓冲液中，加盖，并轻轻转动试管。由于在水溶液中易失效，故尽可能低温保藏，并要现用现配。

②取新鲜的菌体，经前培养至对数期．离心洗涤，用缓冲液制成8 ml菌悬液（107-108ml-1）。对于丝状菌孢子，则前培养至萌动期，悬液含 106 ml-1。

③取EMS母液2ml，加人到以8ml的菌悬液中。在适宜温度下处理一定时间（根据预实验绪果确定）。处理的最终浓度为0 .lmol／L。对于真菌孢子，则为0.2-0.5rnol／L。

④EMS处理一定时间后，用50倍生理盐水稀释或加入一定量的2%NaS2O3溶液或多次离心、洗涤，以终止反应。

EMS是剧毒的诱变剂，在整个诱变过程，包括配制药品、操作处理、保存等都要严守安全，不能接触皮肤，所有接触过EMS的器皿，单独用大量水冲洗洗涤，或用10％NaS2O3溶液浸泡过夜，再用清水冲洗干净。
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2楼2011-12-01 13:13:14
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qinghua_lin

新虫 (初入文坛)
这些步骤我知道，只是我想知道加入硫代硫酸钠后是否还有毒性？用加硫代硫酸钠的处理液操作过程会不会还对人体有危害？
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3楼2011-12-03 14:38:54
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qinghua_lin

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qinghua_lin at 2011-12-03 14:38:54:
这些步骤我知道，只是我想知道加入硫代硫酸钠后是否还有毒性？用加硫代硫酸钠的处理液操作过程会不会还对人体有危害？

我把加硫代硫酸钠的处理液继续培养，里面诱变剂的气味很浓，对人体有没影响呢？
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4楼2011-12-03 14:41:09
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+5): 鼓励交流 2012-02-22 12:37:59
当然有毒性啊，硫代硫酸钠和EMS 是分别两种不同的有毒物质，不过是EMS 毒性更大容易直接引起人类的癌变而已，先不说那味道对人的影响，你就那么继续培养估计你的实验材料也受不了啊，会导致培养条件培养基成分PH的多种不可控制的变化。正常情况应该是终止后在超净台中用离心机低速离心提纯重新放置到没有任何诱变剂的培养液中培养的，我很佩服你的尝试精神，不过怎么也不能带着EMS和硫代硫酸钠一起培养啊，你和材料都会受影响的。
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被迫的无知小小博
5楼2012-02-22 03:55:36
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魂断生物

新虫 (初入文坛)
受教了，谢谢楼上各位！
安全第一啊！
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6楼2012-07-21 15:44:59
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jeffer_ni

铜虫 (初入文坛)
楼主有没有兴趣换种诱变方法呢？我们的ARTP诱变技术可以免费试用的，安全无毒效果好。
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ARTP诱变育种与厌氧/需氧耦合微生物污水处理技术
7楼2013-07-05 16:21:48
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njrice

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-01 13:13:14
EMS的诱变处理方法：

① EMS 母液的配制：为了安全和防上失效，配制前将需用的器皿，置冰箱内预冷，然后在冰浴中进行配制。取0.5ml EMS原液，加人到10 ml pH7.2磷酸缓冲液中，加盖，并轻轻转动试管。由于在水溶液 ...

你好我想问下，EMS可以直接用水稀释吗
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保持乐观
8楼2020-05-20 18:00:58
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happylw104

新虫 (正式写手)
请问EMS能直接灭菌吗？想在组培上使用

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9楼2021-11-08 15:01:22
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