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qinghua_lin

新虫 (初入文坛)

[求助] 甲基磺酸乙酯诱变

请问各位甲基磺酸乙酯诱变时应该如何操作呢?加入5%硫代硫酸钠后是不是可以直接解毒使用了呢?还有是控制5%硫代硫酸钠的终浓度还是按多少比例加入5%硫代硫酸钠?希望各位能尽快帮帮忙,谢谢啦!
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happylw104

新虫 (正式写手)

请问EMS能直接灭菌吗?想在组培上使用

发自小木虫Android客户端
9楼2021-11-08 15:01:22
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fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流。 2011-12-01 19:40:02
EMS的诱变处理方法:

① EMS 母液的配制:为了安全和防上失效,配制前将需用的器皿,置冰箱内预冷,然后在冰浴中进行配制。取0.5ml EMS原液,加人到10 ml pH7.2磷酸缓冲液中,加盖,并轻轻转动试管。由于在水溶液中易失效,故尽可能低温保藏,并要现用现配。

②取新鲜的菌体,经前培养至对数期.离心洗涤,用缓冲液制成8 ml菌悬液(107-108ml-1)。对于丝状菌孢子,则前培养至萌动期,悬液含 106 ml-1。

③取EMS母液2ml,加人到以8ml的菌悬液中。在适宜温度下处理一定时间(根据预实验绪果确定)。处理的最终浓度为0 .lmol/L。对于真菌孢子,则为0.2-0.5rnol/L。

④EMS处理一定时间后,用50倍生理盐水稀释或加入一定量的2%NaS2O3溶液或多次离心、洗涤,以终止反应。

EMS是剧毒的诱变剂,在整个诱变过程,包括配制药品、操作处理、保存等都要严守安全,不能接触皮肤,所有接触过EMS的器皿,单独用大量水冲洗洗涤,或用10%NaS2O3溶液浸泡过夜,再用清水冲洗干净。
2楼2011-12-01 13:13:14
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qinghua_lin

新虫 (初入文坛)

这些步骤我知道,只是我想知道加入硫代硫酸钠后是否还有毒性?用加硫代硫酸钠的处理液操作过程会不会还对人体有危害?
3楼2011-12-03 14:38:54
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qinghua_lin

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qinghua_lin at 2011-12-03 14:38:54:
这些步骤我知道,只是我想知道加入硫代硫酸钠后是否还有毒性?用加硫代硫酸钠的处理液操作过程会不会还对人体有危害?

我把加硫代硫酸钠的处理液继续培养,里面诱变剂的气味很浓,对人体有没影响呢?
4楼2011-12-03 14:41:09
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