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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌经过平板划线活化后怎样降解多环芳烃？
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adhkl佩

新虫 (小有名气)

[求助] 菌经过平板划线活化后怎样降解多环芳烃？

本人不是学生物的，但现在做环境方面的东西，要活化芽孢杆菌等来降解芘，现在活化过程基本了解，困难在于划线之后得到单菌落后不知道改怎么用于降解多环芳烃，要把菌挑出来配溶液吗？烦请各位帮帮忙
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1楼 2011-10-25 16:28:16
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天鸟

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-04 16:15:33
方法是那样的，但是在平板上很难形成降解圈的，最好的方法是液体培养吧，将溶在乙醇中的多环芳烃先加在试管中，挥发完乙醇后，再加入无机盐培养基，使得PAHs是培养基中的唯一碳源，培养一段时间后，看生长的情况。祝好
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快乐生活，我快乐
3楼2011-11-01 09:54:21
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 柳暗花明16 at 2013-12-16 14:22:16
请教一下~测芘的降解效率用高效液相的话，是不是之前得做芘的标线，怎么做呢？...

配成不同浓度的标样，仪器测完会自己出一个标曲的
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處世樹為模，本固任從枝葉動；立身錢作樣，內方還要外邊圓。
15楼2013-12-17 09:38:51
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普通回帖

WSW_Alone

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5, MicEPI+1): 谢谢交流 2011-10-30 23:07:59
adhkl佩(金币+2): 谢谢，你的回复对我还是蛮有用的！ 2011-11-04 13:55:03
有一篇文献：《多环芳烃的微生物降解与生物修复》，郭楚玲等，2000，海洋环境科学。里面谈到了降解多环芳烃的微生物的分离与计数，1）单层平板直接分离法：在固体无机培养基(MSM) 上涂上一层PAHs的丙酮或乙醇溶液, 待有机溶剂充分挥发后, 接入样品溶液,均匀分布在多环芳烃表层上; 1~3星期后,在菌落的旁边可形成一圈光斑,则为多环芳烃降解菌。该方法优点在于便于分离。2）双层平板分离法：双层平板分离法是在对单层平板法改进
的基础上形成的,克服了单层平板法的许多不足,不同之处在于,样品先接种到已含有多环芳烃的熔化的琼脂糖无机培养基中,然后倾入含有无机培养基的固体平板上,上层含有样品的培养基可均匀分布在下层培养基上。该方法形成的菌斑易于确认, 便于计数。
这方面的文献应该挺多的，可以自己找一些看看。
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處世樹為模，本固任從枝葉動；立身錢作樣，內方還要外邊圓。
2楼2011-10-30 22:58:03
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adhkl佩

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by WSW_Alone at 2011-10-30 22:58:03:
有一篇文献：《多环芳烃的微生物降解与生物修复》，郭楚玲等，2000，海洋环境科学。里面谈到了降解多环芳烃的微生物的分离与计数，1）单层平板直接分离法：在固体无机培养基(MSM) 上涂上一层PAHs的丙酮或乙醇溶液 ...

我要用的菌已经活化差不多了，木糖氧化无色杆菌，微嗜酸寡养单胞菌活化不出来，压根不长，不知道是培养基的问题？我想问是不是要配成菌悬液来降解，菌悬液怎样配制呢？
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4楼2011-11-04 13:54:16
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adhkl佩

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 天鸟 at 2011-11-01 09:54:21:
方法是那样的，但是在平板上很难形成降解圈的，最好的方法是液体培养吧，将溶在乙醇中的多环芳烃先加在试管中，挥发完乙醇后，再加入无机盐培养基，使得PAHs是培养基中的唯一碳源，培养一段时间后，看生长的情况。 ...

我的问题不是要筛PAHs的降解菌，我现在是要活化几种多环芳烃降解菌，然后看看这几种菌对芘的降解特性，多谢啦
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5楼2011-11-04 13:57:46
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-04 16:15:43
scelab(金币+3): 谢谢热心回复~ 2011-11-07 23:24:46
引用回帖:
4楼: Originally posted by adhkl佩 at 2011-11-04 13:54:16:
我要用的菌已经活化差不多了，木糖氧化无色杆菌，微嗜酸寡养单胞菌活化不出来，压根不长，不知道是培养基的问题？我想问是不是要配成菌悬液来降解，菌悬液怎样配制呢？

不知道我理解的对不对啊，你是不是想测定你这个菌降解芘的降解率，如果是这样的话，你可以用以芘为唯一碳源配制液体培养基，灭菌后将你获得的降解菌接入，摇瓶培养一段时间后，测定芘的含量，换算一下。  呵呵，我也要做相关的东西，互相交流。
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adhkl佩
處世樹為模，本固任從枝葉動；立身錢作樣，內方還要外邊圓。
6楼2011-11-04 14:07:12
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adhkl佩

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by WSW_Alone at 2011-11-04 14:07:12:
不知道我理解的对不对啊，你是不是想测定你这个菌降解芘的降解率，如果是这样的话，你可以用以芘为唯一碳源配制液体培养基，灭菌后将你获得的降解菌接入，摇瓶培养一段时间后，测定芘的含量，换算一下。  呵呵， ...

确实是，互相学习啊
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7楼2011-11-05 14:05:05
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adhkl佩

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by WSW_Alone at 2011-11-04 14:07:12:
不知道我理解的对不对啊，你是不是想测定你这个菌降解芘的降解率，如果是这样的话，你可以用以芘为唯一碳源配制液体培养基，灭菌后将你获得的降解菌接入，摇瓶培养一段时间后，测定芘的含量，换算一下。  呵呵， ...

你用的什么培养基啊，我的长不出来，想换种试试
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8楼2011-11-07 21:40:57
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by adhkl佩 at 2011-11-07 21:40:57:
你用的什么培养基啊，我的长不出来，想换种试试

我做的不是多环芳烃，是其他的。
资料里的那些培养基都长不出来吗？还有就是你之前不是说已经筛到菌了吗，筛菌的时候用的什么培养基呀？
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處世樹為模，本固任從枝葉動；立身錢作樣，內方還要外邊圓。
9楼2011-11-07 22:55:52
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匿名

用户注销 (知名作家)
★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): good，希望能帮到lz 2011-11-08 08:35:17
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10楼2011-11-08 08:11:56
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