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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

[求助] 乳酸菌L.casei的培养

用国外寄过来的固体培养的L.casei进行活化扩大培养,使用的培养基是MRS,文献上说要在培养基中加入5μg/ml的红霉素,于是使用液体MRS过夜培养,不摇动,37℃,再转入固体培养基时发现根本长不起来,试过很多次,液体的培养基不管加或不加抗生素都可以长出来,不过不加抗生素的长的较好,在固体培养集中不管加或不加抗生素都不能长,请问各位虫友问题出现在哪里呢?
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-06 10:24:06
如果只是一株单菌,应该很好培养的
不论用MRS-broth还是MRS-agar,都能很好生长的
你加红霉素的目的不明确啊,一般加抗生素是抑制其它菌的生长,你的是单菌,没必要加的
针对你的问题,你试试在MRS-broth里多传几代,然后在MRS-agar里培养
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
3楼2013-03-06 09:30:14
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fakeandff

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-06 10:24:01
我不清楚你是怎样转移到固体培养基上的,是划线在表面还是混合培养的,乳酸菌一般是厌氧菌,如果转移到固体上应该是混合培养,长在底部或者悬浮在中层,也可以做夹层培养,目的就是制造一个厌氧的环境。
2楼2013-03-06 09:25:20
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fakeandff at 2013-03-06 09:25:20
我不清楚你是怎样转移到固体培养基上的,是划线在表面还是混合培养的,乳酸菌一般是厌氧菌,如果转移到固体上应该是混合培养,长在底部或者悬浮在中层,也可以做夹层培养,目的就是制造一个厌氧的环境。

用固体培养基时,我划线和混合培养都试过,而且将培养皿用封口膜包紧了也还是没有菌落啊,不知道问题在哪边
4楼2013-03-06 14:24:24
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-03-06 09:30:14
如果只是一株单菌,应该很好培养的
不论用MRS-broth还是MRS-agar,都能很好生长的
你加红霉素的目的不明确啊,一般加抗生素是抑制其它菌的生长,你的是单菌,没必要加的
针对你的问题,你试试在MRS-broth里多 ...

我是看到文献上面在培养基中加红霉素的,不知道是不是L.casei菌株中本身含有红霉素抗性基因,因为没有查到,所以就照做了。
我之前有看到你的回复说先用脱脂牛奶培养活化一下,不知道这边是否适用?
新手入门,嘿嘿。。
5楼2013-03-06 14:35:33
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