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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 乳酸菌L.casei的培养
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

[求助] 乳酸菌L.casei的培养

用国外寄过来的固体培养的L.casei进行活化扩大培养，使用的培养基是MRS，文献上说要在培养基中加入5μg/ml的红霉素，于是使用液体MRS过夜培养，不摇动，37℃，再转入固体培养基时发现根本长不起来，试过很多次，液体的培养基不管加或不加抗生素都可以长出来，不过不加抗生素的长的较好，在固体培养集中不管加或不加抗生素都不能长，请问各位虫友问题出现在哪里呢？
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1楼 2013-03-06 09:21:10
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-06 10:24:06
如果只是一株单菌，应该很好培养的
不论用MRS－broth还是MRS－agar，都能很好生长的
你加红霉素的目的不明确啊，一般加抗生素是抑制其它菌的生长，你的是单菌，没必要加的
针对你的问题，你试试在MRS－broth里多传几代，然后在MRS-agar里培养
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
3楼2013-03-06 09:30:14
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fakeandff

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-06 10:24:01
我不清楚你是怎样转移到固体培养基上的，是划线在表面还是混合培养的，乳酸菌一般是厌氧菌，如果转移到固体上应该是混合培养，长在底部或者悬浮在中层，也可以做夹层培养，目的就是制造一个厌氧的环境。
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2楼2013-03-06 09:25:20
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fakeandff at 2013-03-06 09:25:20
我不清楚你是怎样转移到固体培养基上的，是划线在表面还是混合培养的，乳酸菌一般是厌氧菌，如果转移到固体上应该是混合培养，长在底部或者悬浮在中层，也可以做夹层培养，目的就是制造一个厌氧的环境。

用固体培养基时，我划线和混合培养都试过，而且将培养皿用封口膜包紧了也还是没有菌落啊，不知道问题在哪边
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4楼2013-03-06 14:24:24
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-03-06 09:30:14
如果只是一株单菌，应该很好培养的
不论用MRS－broth还是MRS－agar，都能很好生长的
你加红霉素的目的不明确啊，一般加抗生素是抑制其它菌的生长，你的是单菌，没必要加的
针对你的问题，你试试在MRS－broth里多 ...

我是看到文献上面在培养基中加红霉素的，不知道是不是L.casei菌株中本身含有红霉素抗性基因，因为没有查到，所以就照做了。
我之前有看到你的回复说先用脱脂牛奶培养活化一下，不知道这边是否适用？
新手入门，嘿嘿。。
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5楼2013-03-06 14:35:33
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