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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

[求助] 乳酸菌L.casei的培养

用国外寄过来的固体培养的L.casei进行活化扩大培养,使用的培养基是MRS,文献上说要在培养基中加入5μg/ml的红霉素,于是使用液体MRS过夜培养,不摇动,37℃,再转入固体培养基时发现根本长不起来,试过很多次,液体的培养基不管加或不加抗生素都可以长出来,不过不加抗生素的长的较好,在固体培养集中不管加或不加抗生素都不能长,请问各位虫友问题出现在哪里呢?
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by fakeandff at 2013-03-06 09:25:20
我不清楚你是怎样转移到固体培养基上的,是划线在表面还是混合培养的,乳酸菌一般是厌氧菌,如果转移到固体上应该是混合培养,长在底部或者悬浮在中层,也可以做夹层培养,目的就是制造一个厌氧的环境。

用固体培养基时,我划线和混合培养都试过,而且将培养皿用封口膜包紧了也还是没有菌落啊,不知道问题在哪边
4楼2013-03-06 14:24:24
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xiangxuanji

新虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-03-06 09:30:14
如果只是一株单菌,应该很好培养的
不论用MRS-broth还是MRS-agar,都能很好生长的
你加红霉素的目的不明确啊,一般加抗生素是抑制其它菌的生长,你的是单菌,没必要加的
针对你的问题,你试试在MRS-broth里多 ...

我是看到文献上面在培养基中加红霉素的,不知道是不是L.casei菌株中本身含有红霉素抗性基因,因为没有查到,所以就照做了。
我之前有看到你的回复说先用脱脂牛奶培养活化一下,不知道这边是否适用?
新手入门,嘿嘿。。
5楼2013-03-06 14:35:33
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xiangxuanji

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内容已删除
7楼2013-03-06 16:00:32
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xiangxuanji

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8楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-03-07 08:53:29
对,就是那个配方
灭菌不就是高压锅灭菌吗?121度7min就可以了
正常情况下在冰箱里放一个月应该是没有问题的,发酵发臭的话可能说明这个菌不对了
你没有这个菌的原始菌粉吗,有的话再活化一遍啊...

没有菌粉,就是给的固体培养基中培养的菌,那种不需要活化吗?
我昨天试过混合培养,长起来了,太高兴了!不知道是不是乳酸杆菌,再做个革兰氏染色试试。
9楼2013-03-07 09:35:29
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xiangxuanji

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引用回帖:
10楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-03-07 20:16:36
弱弱地问一句,什么叫混合培养

不知道专业不专业。。我就是在培养皿底部倒的固体培养基然后划线,再在上面加一层固体培养基。
其实L.casei培养温度是30℃呢。。
11楼2013-03-08 08:50:10
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