24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1269  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jasminezhao

金虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质印迹目的蛋白质量测定 已有3人参与

最近在做western blot 的实验,做完之后用BCA法测定了蛋白质的浓度,但是怎么能够知道目的蛋白的质量啊?用什么方法进行测定?谢谢各位大侠了!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的蛋白在总蛋白中的含量?通过凝胶成像软件的光密度分析去算一下吧
5楼2013-03-05 12:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

什么叫做:“做完之后用BCA法测定了蛋白质的浓度”?不是先进行蛋白定量再做western blot吗?我们是这么做的,保证每个lane上样的蛋白量一致。至于怎么定量,用BSA作为标准品,先做个标准曲线呀。你买的BCA试剂盒里面应该有标准曲线的做法吧
2楼2013-03-04 21:22:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasminezhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-04 21:22:38
什么叫做:“做完之后用BCA法测定了蛋白质的浓度”?不是先进行蛋白定量再做western blot吗?我们是这么做的,保证每个lane上样的蛋白量一致。至于怎么定量,用BSA作为标准品,先做个标准曲线呀。你买的BCA试剂盒里 ...

正常情况下是应该先做BCA ,再做WB,但是这次有点小状况就先做了WB,加样的体积是一样的,但是现在就是不知道量是多少,用法BCA法只能知道总蛋白质的量,我现在想知道的是怎么求某一蛋白质的量,例如我的目的蛋白的量。谢谢!!
3楼2013-03-05 10:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aixia5

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用BSA不同浓度梯度做一个标准曲线,在用你的目的蛋白所测的值看在曲线中对应的浓度。BCA试剂盒里有具体的说明呢。
4楼2013-03-05 11:03:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工300求调剂 +27 肖开文 2026-04-09 29/1450 2026-04-10 08:26 by Sammy2
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +10 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 11/550 2026-04-09 19:51 by gong120082
[考研] 电子信息270求调剂 +11 terminal469 2026-04-07 11/550 2026-04-09 18:28 by hy861222
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[考研] 085501机械英二77总分294求调剂,接受跨专业学习 +6 守法公民亓纪 2026-04-08 6/300 2026-04-09 15:55 by wp06
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +5 Ytyt11 2026-04-09 6/300 2026-04-09 14:40 by Ytyt11
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +9 月@163.com 2026-04-07 11/550 2026-04-08 14:48 by qlm5820
[考研] 277求调剂 +4 考研调剂lxh 2026-04-06 6/300 2026-04-08 10:40 by 逆水乘风
[考研] 专硕085403,291分,有两篇专利,一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +4 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 15:22 by wos666
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +6 cs0106 2026-04-03 6/300 2026-04-04 11:20 by w_xuqing
[考研] 求调剂,一志愿南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-04-03 10/500 2026-04-04 09:01 by T可可西里T
[考研] 387求调剂 +4 爱吃片豆土 2026-04-03 5/250 2026-04-04 08:10 by 岸上的一条鱼
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 289-求调剂 +4 这里是_ 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:23 by 1753564080
[考研] 313求调剂 +3 ~微微凉~ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
信息提示
请填处理意见