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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新手关于T细胞培养的问题请教大家
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tjufyn

金虫 (正式写手)

[求助] 新手关于T细胞培养的问题请教大家

请教各位，

我刚刚接触T细胞培养，细胞样品是冷冻的，从别处一天运来。我解冻后更换了media（成分为RPMI1640+FBS），然后用显微镜数了一下细胞。现在已经过了两天了，media有一些变色的迹象，显微镜下观察细胞数目确实增多了，但是细胞的大小相比刚运来时却小了很多。我的问题是：
（1）请问细胞变小这是不是意味着快死了呢？
（2）有什么方法能分辨细胞死亡或是alive吗？我的方法是先取出微量的细胞溶液然后加入dye，在显微镜下观察细胞内部能够被染色的就是死亡的，不能被染色（透明的）就是alive的。但是目前细胞太小了，实在是不好分辨。请问还有没有别的办法？
（3）我看有人的media了里加了盘尼西林，但是刚解冻的细胞是不是需要缓两天再加抗生素会比较好呢

十分感谢大家
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大家好
1楼 2013-03-04 02:28:09
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peakg7

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
tjufyn: 金币+100, ★★★★★最佳答案 2013-03-05 23:54:36
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 鼓励积极热心应助 2013-03-06 08:12:18
细胞变小，不是意味着变死，可能是恢复正常状态，t细胞就是很小。如果细胞培养基颜色有变化，更说明是活细胞，只有消耗了营养才会变色。因此不用判断，你的细胞应该是活的好好地。细胞间条件好，规范操作，可以不用加抗生素的，污染的可能性很小的。一开始加抗生素跟到后面再加，应该不会有太大差异。
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2楼2013-03-04 14:57:44
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