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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化

我用镍柱纯化下来的蛋白在冻融一两次后,大部分蛋白就发生沉淀了,这是为什么?有方法避免吗?
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饼哥

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 哆啦B梦1024 at 2013-04-20 21:23:39
没有啊 就是正常的按过镍柱的方法,用的平衡和上样缓冲液是Tris和NaCl ph7.36,洗杂缓冲液里含20mM的咪唑,洗脱缓冲液含200mM的咪唑。没有加其他任何东西……...

你透析除咪唑了吗?
爱科研,更爱小木虫!
14楼2013-04-22 12:45:45
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jiangyhai

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加5-50%的甘油试试。
静心做事。
2楼2013-03-02 20:52:49
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiangyhai at 2013-03-02 20:52:49
加5-50%的甘油试试。

为什么会沉淀呢?跟咪唑浓度有关吗?
3楼2013-03-03 09:45:25
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崔士元

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白反复冻融会不会失活?蛋白失活应会沉淀吧
男人,就要对自己狠一点!
4楼2013-03-03 14:06:18
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