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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 饼哥 at 2013-03-05 13:50:14
洗脱下来的蛋白液先存放于4℃，取少量样品马上用SDS-PAGE检测纯化效果，若纯化合格，立刻用透析法除去目的蛋白洗脱液中的咪唑。若有必要，还需用PEG包埋法或超滤法浓缩目的蛋白，提高蛋白浓度，因为蛋白质浓度过低会 ...

你好，我最近也是遇到这样的问题，冷冻干燥后得到蛋白粉末，然后用磷酸缓冲液也不溶，用过柱子的上样缓冲液也不溶，请问这是什么原因呢？谢谢啦~
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11楼2013-04-19 19:38:13
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饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 哆啦B梦1024 at 2013-04-19 19:38:13
你好，我最近也是遇到这样的问题，冷冻干燥后得到蛋白粉末，然后用磷酸缓冲液也不溶，用过柱子的上样缓冲液也不溶，请问这是什么原因呢？谢谢啦~...

你是不是加了塑化剂？
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爱科研，更爱小木虫！
12楼2013-04-20 16:24:22
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 饼哥 at 2013-04-20 16:24:22
你是不是加了塑化剂？...

没有啊 就是正常的按过镍柱的方法，用的平衡和上样缓冲液是Tris和NaCl ph7.36，洗杂缓冲液里含20mM的咪唑，洗脱缓冲液含200mM的咪唑。没有加其他任何东西……
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13楼2013-04-20 21:23:39
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饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 哆啦B梦1024 at 2013-04-20 21:23:39
没有啊 就是正常的按过镍柱的方法，用的平衡和上样缓冲液是Tris和NaCl ph7.36，洗杂缓冲液里含20mM的咪唑，洗脱缓冲液含200mM的咪唑。没有加其他任何东西……...

你透析除咪唑了吗？
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爱科研，更爱小木虫！
14楼2013-04-22 12:45:45
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 饼哥 at 2013-04-22 12:45:45
你透析除咪唑了吗？...

透析了啊……
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15楼2013-04-22 20:30:03
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