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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 饼哥 at 2013-03-05 13:50:14
洗脱下来的蛋白液先存放于4℃,取少量样品马上用SDS-PAGE检测纯化效果,若纯化合格,立刻用透析法除去目的蛋白洗脱液中的咪唑。若有必要,还需用PEG包埋法或超滤法浓缩目的蛋白,提高蛋白浓度,因为蛋白质浓度过低会 ...

你好,我最近也是遇到这样的问题,冷冻干燥后得到蛋白粉末,然后用磷酸缓冲液也不溶,用过柱子的上样缓冲液也不溶,请问这是什么原因呢?谢谢啦~
11楼2013-04-19 19:38:13
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饼哥

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 哆啦B梦1024 at 2013-04-19 19:38:13
你好,我最近也是遇到这样的问题,冷冻干燥后得到蛋白粉末,然后用磷酸缓冲液也不溶,用过柱子的上样缓冲液也不溶,请问这是什么原因呢?谢谢啦~...

你是不是加了塑化剂?
爱科研,更爱小木虫!
12楼2013-04-20 16:24:22
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 饼哥 at 2013-04-20 16:24:22
你是不是加了塑化剂?...

没有啊 就是正常的按过镍柱的方法,用的平衡和上样缓冲液是Tris和NaCl ph7.36,洗杂缓冲液里含20mM的咪唑,洗脱缓冲液含200mM的咪唑。没有加其他任何东西……
13楼2013-04-20 21:23:39
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饼哥

木虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 哆啦B梦1024 at 2013-04-20 21:23:39
没有啊 就是正常的按过镍柱的方法,用的平衡和上样缓冲液是Tris和NaCl ph7.36,洗杂缓冲液里含20mM的咪唑,洗脱缓冲液含200mM的咪唑。没有加其他任何东西……...

你透析除咪唑了吗?
爱科研,更爱小木虫!
14楼2013-04-22 12:45:45
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 饼哥 at 2013-04-22 12:45:45
你透析除咪唑了吗?...

透析了啊……
15楼2013-04-22 20:30:03
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