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对月流珠

新虫 (初入文坛)

[求助] 虫友们帮帮忙哈，关于基因克隆的。

虫友们，小女子研一，要开始做实验了，发现书上学的东西做实验的时候不晓得该怎么用。现在知道一种酵母的某个酶的基因序列，导师让P出另一种酵母这个酶的基因序列。酶的序列和第一种酵母的这个酶的基因序列是已知的。请问该怎么做啊？
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1楼 2013-03-02 10:04:20
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lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你查查基因的同源克隆，这个方法可以通过同源克隆的方法拿到全长基因。
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2楼2013-03-02 15:46:14
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对月流珠

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lishaohe at 2013-03-02 15:46:14
建议你查查基因的同源克隆，这个方法可以通过同源克隆的方法拿到全长基因。

我有一些疑惑。我看到很多书上是用氨基酸的保守序列设计简并引物来扩增的，那么保守序列肯定在起始密码子和终止密码子之间，也就是说这样我们得到的序列不是全部的编码序列，而是部分。那怎么才能得到全部的编码框，以便与以后做克隆和表达呢？
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3楼2013-03-02 16:11:36
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lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
对月流珠: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-04 15:57:45
依据保守序列进行同源克隆肯定得到的是部分片段，如果想得到全长，还需要进行5‘RACE和3’RACE
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4楼2013-03-02 20:36:29
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对月流珠

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lishaohe at 2013-03-02 20:36:29
依据保守序列进行同源克隆肯定得到的是部分片段，如果想得到全长，还需要进行5‘RACE和3’RACE

嗯 我现在也是这么想的 我想咨询一下楼上会设计简并引物吗？
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5楼2013-03-04 15:57:17
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lishaohe

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
对月流珠: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-03-05 19:27:32
嗯，很久以前设计过。
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6楼2013-03-04 20:33:26
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