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tjulxy

铁虫 (初入文坛)

[求助] 做DGGE所用取代EB的荧光染料应为SYBR Green 1 还是SYBR Green 2 已有2人参与

求助各位大神
      由于EB的毒性大,实验室打算用SYBR Green 取代EB做DGGE。对于微生物样品,经过DNA提取-PCR,在DGGE时应该用SYBR Green 1 还是SYBR Green 2染色?
      我们看过SYBR Green 1的使用说明,上面主要介绍了琼脂糖凝胶电泳的染色方面(点染法和胶染法),对于聚丙烯酰胺电泳应该用什么方法染色,具体的操作步骤是什么?
      如果提取DNA后,进行实时定量PCR应该用上面那个荧光染料呢?
      实验室主要做环境方面的研究,对于分子生物学方面的知识非常欠缺,还望有经验的大神不吝赐教。非常感谢!
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前路艰辛,努力拼搏
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tjulxy

铁虫 (初入文坛)

没人理。。
前路艰辛,努力拼搏
2楼2013-02-28 10:59:41
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wangdongadd

新虫 (小有名气)

请问lz的问题得到解决了吗?
3楼2013-07-09 10:43:09
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wangdongadd

新虫 (小有名气)

请问楼主问题解决了吗?现在遇到同样的问题。
4楼2013-08-06 10:36:48
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jxmingcyl

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

SYBR Green 1 ,是这个,我就是用这个染色的,或者银染,不过银染切胶回收很难回收到,所以还是用核酸染料染
5楼2013-08-11 17:31:40
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asang1989

木虫 (小有名气)

咱们遇到的问题一模一样啊,我们实验室也是主要做环境方向的,请问你的问题是怎样解决的?
人在社会,身不由己!
6楼2014-03-13 13:03:51
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asang1989

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jxmingcyl at 2013-08-11 17:31:40
SYBR Green 1 ,是这个,我就是用这个染色的,或者银染,不过银染切胶回收很难回收到,所以还是用核酸染料染

请问,这个SYBR Green1怎么染色,谢啦。
人在社会,身不由己!
7楼2014-03-13 13:04:52
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asang1989

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dllchina: 金币+3, 谢谢应助,多多交流 2014-03-14 13:21:29
楼主,我昨天刚刚做完DGGE,我用的是SYBR Green1,用1*TAE缓冲液稀释一万倍,然后涂于胶膜表面,染色30分钟,然后用无菌水漂洗10分钟,再染色30分钟,用无菌水漂洗干净,就可以用UVP仪拍照了!
人在社会,身不由己!
8楼2014-03-14 08:47:33
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547star

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by asang1989 at 2014-03-14 08:47:33
楼主,我昨天刚刚做完DGGE,我用的是SYBR Green1,用1*TAE缓冲液稀释一万倍,然后涂于胶膜表面,染色30分钟,然后用无菌水漂洗10分钟,再染色30分钟,用无菌水漂洗干净,就可以用UVP仪拍照了!

请问你用的是哪个公司哪个货号的SYBR Green I?
为什么
9楼2014-03-16 22:32:20
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asang1989

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 547star at 2014-03-16 22:32:20
请问你用的是哪个公司哪个货号的SYBR Green I?...

我查了查,是Solarbio 公司生产的,货号是 Cat No:SY1020,希望能帮到你。
人在社会,身不由己!
10楼2014-03-17 08:19:43
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