| 查看: 803 | 回复: 3 | |||
legendkiller银虫 (小有名气)
|
[求助]
求助建立逆转录病毒载体颗粒生产细胞系的相关问题
|
|
我最近看到一篇文章是“建立逆转录病毒载体颗粒生产细胞系”的文章，他是先用病毒转化哺乳动物细胞，然后培养获得病毒颗粒，再用此病毒颗粒去感染肿瘤细胞来获得逆转录病毒载体颗粒生产细胞系。 我想问一下，既然哺乳动物细胞能生产该病毒颗粒，为什么还要去感染肿瘤细胞呢 或是为什么不直接感染肿瘤细胞呢 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有297人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 逆转录病毒载体的质粒是否可用普通的方法做转染？？
已经有4人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2013-02-25 13:34:19
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2013-02-25 13:34:19
|
作为外源基因导入的手段，假病毒颗粒侵染和普通的基因转染有许多不同的特点。 一、假病毒侵染的导入效率要高于转染。这一点在比较容易转染的细胞上可能不明显，但在比较难以转染的细胞上，假病毒侵染就比转染有优势的多，就lz帖中的疑问“为什么不直接感染肿瘤细胞呢？”，许多情况就是因为目的细胞系难以转染，或是转染率不高，不能满足实验的要求（比如基于shRNA的Knock down实验，要求转染率要大于50%，甚至70%），这时候用假病毒侵染就是解决问题的选择之一（一般假病毒颗粒的生产细胞都是易于转染的，比如HEK293）； 二、假病毒侵染导入的基因转录/表达的持续性要高于转染。一般假病毒导入的基因，不易被宿主丢失，不仅在瞬时转染的实验中，基因转录/表达的持续时间长（比如Knockdown实验中，假病毒侵染的Knockdown可以持续1week以上，而普通瞬时转染的Knockdown效果，一般就2-4天，最多也不过10天），在稳定转染的实验中，病毒侵染的细胞获得稳定表达（插入基因组）的效率也要高出普通转染很多。 三、假病毒侵染的灵活性要比普通转染高。比如做体内转染，在比如做特异细胞导入（普通转染是非特异的导入，而假病毒侵染，可以通过改变病毒的包膜蛋白颗粒，而改变其侵染的嗜性，从而做到特异导入）。 假病毒侵染的优势还很多，当然并不是说病毒侵染就多么多么高级，这些都只是手段，根据不同的条件和目的供人选择而已。希望能帮到lz。 |
2楼2013-02-23 12:48:43
legendkiller3楼2013-02-23 13:55:06
legendkiller
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 205
- 帖子: 172
- 在线: 61.2小时
- 虫号: 871964
- 注册: 2009-10-14
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
4楼2013-02-24 20:33:41