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七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] 多糖抗氧化测DPPH清除率实验的问题 已有1人参与

今天做了多糖抗氧化测DPPH的实验,问题很多:
1、DPPH用无水乙醇溶的,然后实验出现了絮状沉淀。
2、空白组吸光度超过了1。
3、加了多糖样液的部分样品吸光度超过了空白。

多糖制备的时候是用醇沉的,多糖不溶于醇,DPPH又是用无水乙醇配的,正常情况下是会沉淀的吧???有没有办法解决这些问题呢???求教大神们了,很急啊!!
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学无涯zsp

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 回帖置顶 2013-01-24 07:43:13
sweety: 金币+1, 鼓励新虫应助 2013-01-26 17:48:12
我也有用DPPH自由基来测样品的抗氧化能力,浓度为0.1mM的DPPH无水乙醇溶液在517nm下吸光度是0.9以上,所以不加抗氧化剂的空白对照中DPPH的浓度为0.1mM较好。我是用0.2mM的DPPH溶液和待测样品同体积混合。针对你的问题:1 出现絮状物应该是溶解问题:可能你的糖提取液跟DPPH溶液不能混溶,也可能反应产物不能很好溶解,还可能。。。;2 浓度为0.1mM的DPPH无水乙醇溶液在517nm下吸光度由于仪器、参比等客观条件也可能会大于1,我实验数据也有稍大于1的;3吸光度大于空白,可能是因为你体系形成的絮状物造成的干扰,原则下,分光光度法要求待测液是溶液(也就是要澄清透明的)。希望对你有帮助。
8楼2013-01-23 15:27:36
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慧儿

银虫 (小有名气)

絮状沉淀应该是多糖吧,多糖不是水提醇沉么呵呵,空白组超过1,是不是因为你dpph浓度过高呢?加了样品的吸光度超过空白?那可能是你多糖不纯的,是不是里面参杂了别的色素之类东西呢......
做个简单的人,不浮不躁不争不抢!
2楼2013-01-21 09:00:10
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水凝胶

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇到过这事由于糖浓度过高的原因,你把浓度降低就ok啦,
3楼2013-01-21 11:23:46
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七小艾

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 水凝胶 at 2013-01-21 11:23:46
我也遇到过这事由于糖浓度过高的原因,你把浓度降低就ok啦,

低的话有效果吗??因为我做ABTS的时候,浓度达到4mg/ml的时候自由基清除率也才达到50%多一点
4楼2013-01-21 19:37:27
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