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七小艾

新虫 (小有名气)

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[求助] 多糖抗氧化测DPPH清除率实验的问题已有1人参与

今天做了多糖抗氧化测DPPH的实验，问题很多：
1、DPPH用无水乙醇溶的，然后实验出现了絮状沉淀。
2、空白组吸光度超过了1。
3、加了多糖样液的部分样品吸光度超过了空白。

多糖制备的时候是用醇沉的，多糖不溶于醇，DPPH又是用无水乙醇配的，正常情况下是会沉淀的吧？？？有没有办法解决这些问题呢？？？求教大神们了，很急啊！！

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1楼 2013-01-20 23:46:47

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学无涯zsp

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
sweety: 金币+1, 应助指数+1 2013-01-26 17:48:30
sweety: 鼓励新虫应助 2013-01-26 17:48:36

引用回帖:

9楼: Originally posted by 七小艾 at 2013-01-23 17:58:42
是的呢，样液在醇里溶解性很差，我试过把糖浓度降到0.4mg/ml，在2ml乙醇里加入200微升糖液也沉淀了。。
看到论坛里有说用CMC乳化剂的，但是找不到相关的文献。。。
还有用DMSO溶解DPPH的，但是那个好像基本是用液 ...

你的样品是用醇沉的，所以我觉得你可能不适合用DPPH这个方法测量，因为DPPH要么用甲醇溶解要么用乙醇溶解来制备，不知道你换成甲醇还会不会出现这个问题。考虑乳化剂是一个解决的办法，我见过的有SDS的，环状糊精的，也有你说的DMSO的，如果还用分光，波光应该还是原来的波长，因为原理是没变的，不放心的话，做个波长扫描就行了，很方便的；另外，你可以考虑看能不能更换样品的溶剂，比如丙酮。如果都不行的话，可以考虑换方法啊，测清除自由基能力的方法很多的，不一定局限于这一种。