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trancy鱼

银虫 (初入文坛)

[求助] 液相C30跑流动相柱压持续升高

本人刚接触液相,但是最近遇到一系列问题需要请教各位:
我用的是C30柱,载碳量比一般的C18要高一些,主要是分离类胡萝卜素的顺反异构体,类胡萝卜素极性都很小,因此用的流动相含有洗脱能力较强的MTBE(甲基叔丁基醚,中等极性)。之前柱子有些堵,后来冲好了,压力也趋于正常。但是现在又遇到麻烦了,我用纯乙腈,0.8的流速冲柱时压力挺正常的,40bar左右,上下浮动1-2bar,但是转换到我的流动相(MEOH和MTBE约1:1)是压力开始从66bar不停的往上升,大概3-4分钟上升1bar左右,平衡了一个多小时柱压还是不停上升,基线波动倒是不大,我上了一个样试了试,柱压还是在上升,到后来和另一种流动相混合(MEOH和MTBE约10:90)后压力才降低到70bar。
请教各位大侠,我这种情况是什么原因引起的,该怎么处理?现在急着做实验,都快愁死了。谢谢各位的帮忙!!!
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加油
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ruiyi1101

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-01-08 17:00:21
胡萝卜素是酯溶性的,用C30柱(有极强的疏水性),胡萝卜素会有很强的保留,建议用纯的硅胶柱,正相分离的模式,尝试一下顺反异构体的分离。

注意流动相中各有机溶剂的互溶性,甲醇、乙腈、乙醇在正己烷、乙醚、甲基叔丁基醚中相互溶解比例需要注意。
3楼2013-01-08 13:29:42
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wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用的也是反相柱吧?没有水作为流动相而全是有机相吗?反相柱要用到水的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-01-08 10:41:43
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trancy鱼

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wy1518 at 2013-01-08 10:41:43
你用的也是反相柱吧?没有水作为流动相而全是有机相吗?反相柱要用到水的

嗯,我的流动相中含有少量的水,只是比例比较小,如果比例较大样品可能不溶于流动相。我咨询了卖柱子的厂家,这个柱子是可以用纯有机溶剂作为流动相的。一般的反相柱不用水对柱子影响很大吗?
加油
4楼2013-01-08 22:52:41
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trancy鱼

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ruiyi1101 at 2013-01-08 13:29:42
胡萝卜素是酯溶性的,用C30柱(有极强的疏水性),胡萝卜素会有很强的保留,建议用纯的硅胶柱,正相分离的模式,尝试一下顺反异构体的分离。

注意流动相中各有机溶剂的互溶性,甲醇、乙腈、乙醇在正己烷、乙醚、 ...

谢谢,已经尝试过用正相柱分离,效果不太理想。今天用流动相平衡了,压力又正常了,也不知道什么原因。
加油
5楼2013-01-08 22:54:25
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