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RX_豆丁

铁虫 (正式写手)

[求助] 【lowry测酶活性,怎么确定光波长和做标准曲线】求问大神

本人本科生,实验能力灰常一般,想求助各位,越详细越好,刚注册也木有多少金币可以给……希望能得到好心人帮助,谢谢啦~
我们做的是  测定某虫子身体中不同情况下 5 种酶中,哪种酶占主导。看了一些文献,都是用分光光度计来测酶活性和含量。但是不知道怎么确定哪种酶用哪种波长来测定。还有标准牛血清蛋白配比的浓度和测定牛血清的波长怎么确定呢?
看了一些文献,都没有详细的写出这些实验步骤要求,比较纠结,有点头大~~
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考上研究生的都是神
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RX_豆丁

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-12-30 12:49:00
lowry法测不了活性,只能测蛋白浓度。
它是蛋白浓度测定的通用方法,所以区分不出你的样品中哪种蛋白占主导,测定的是你样品中所有蛋白的含量。
你想知道你样品中几种蛋白的比例,那么你可以分别纯化出来,然后分 ...

谢谢哈
考上研究生的都是神
6楼2012-12-31 10:01:16
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查看全部 7 个回答

RX_豆丁

铁虫 (正式写手)

进了这个论坛我就晕了,本来打算试试考研的,这么一看,考的信心都没有了求各路大神帮忙啊
考上研究生的都是神
2楼2012-12-29 21:53:24
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egaoxy

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
波长扫描可以确定
3楼2012-12-29 22:05:56
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
RX_豆丁: 金币+1, 有帮助 2012-12-31 10:00:54
lowry法测不了活性,只能测蛋白浓度。
它是蛋白浓度测定的通用方法,所以区分不出你的样品中哪种蛋白占主导,测定的是你样品中所有蛋白的含量。
你想知道你样品中几种蛋白的比例,那么你可以分别纯化出来,然后分别测定其含量,当然纯化过程或有损失;要不你知道其中的各种主要酶的比活也可以,通过测定样品中其活性,计算出各自的蛋白浓度。
至于检测波长,现在改良法为650nm,而这个是蛋白复合物的吸收峰波长,不论你是蛋白a,还是蛋白b,还是牛血清白蛋白;有对照品做标准曲线,这个波长差点也无所谓。
标准曲线的范围和测定方法,在网上搜搜。
4楼2012-12-30 12:49:00
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