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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)

[求助] 不懂就要问,求大神目测下质粒浓度……

如图,中间的MARKER从下往上数第四条(750bp)是100ng,再往上的条带是50ng。右边为PCR产物,应该是50ng吧,左边为质粒,那大概是多少ng呢……求大神分析……质粒是准备用来做双酶切后回收,然后酶连转化用的……

IMG_2181.JPG
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 回帖置顶 2012-11-30 07:33:44
感觉回收后只有10ng左右,连接应该可以的,我曾经5ng成功过,回收试试看看
5楼2012-11-29 17:03:39
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普通回帖

winner00lk

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
目测你的质粒浓度在2~4ng之间,如果确认了大小正确的话。
我从远方来,没带走一丝遗憾
2楼2012-11-29 13:58:26
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我怎么觉得有个10ng的样子……
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
3楼2012-11-29 14:43:02
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wxlzzzz

新虫 (初入文坛)

你做了什么,什么都没做。
4楼2012-11-29 15:06:26
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by winner00lk at 2012-11-29 13:58:26
目测你的质粒浓度在2~4ng之间,如果确认了大小正确的话。

大小基本正确
6楼2012-11-29 23:23:01
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Marado at 2012-11-29 14:43:02
我怎么觉得有个10ng的样子……

突然想起来貌似有软件可以分析的,准备下下来试试……
7楼2012-11-29 23:23:49
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wxlzzzz at 2012-11-29 15:06:26
25 ng

眼神这么好……
8楼2012-11-29 23:24:07
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by dshlove at 2012-11-29 17:03:39
感觉回收后只有10ng左右,连接应该可以的,我曾经5ng成功过,回收试试看看

那你酶连的比例是多少呢?是不是也是PCR产物比质粒亮很多?
9楼2012-11-29 23:25:12
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by cdkey4567 at 2012-11-29 23:25:12
那你酶连的比例是多少呢?是不是也是PCR产物比质粒亮很多?...

我都是小片段和大片段按照10:1添加的,总体积不超过共转化体系的十分之一,一般都是PCR产物比质粒亮,嘿嘿,你要是酶比较好,可以在切质粒时候,多切点,这样回收后浓度就高了。
10楼2012-11-30 09:00:46
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