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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 不懂就要问，求大神目测下质粒浓度……
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)

[求助] 不懂就要问，求大神目测下质粒浓度……

如图，中间的MARKER从下往上数第四条（750bp）是100ng，再往上的条带是50ng。右边为PCR产物，应该是50ng吧，左边为质粒，那大概是多少ng呢……求大神分析……质粒是准备用来做双酶切后回收，然后酶连转化用的……

IMG_2181.JPG
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1楼 2012-11-28 15:55:13
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回帖置顶 ( 共有1个 )

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 回帖置顶 2012-11-30 07:33:44
感觉回收后只有10ng左右，连接应该可以的，我曾经5ng成功过，回收试试看看
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5楼2012-11-29 17:03:39
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普通回帖

winner00lk

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目测你的质粒浓度在2~4ng之间，如果确认了大小正确的话。
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我从远方来，没带走一丝遗憾
2楼2012-11-29 13:58:26
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我怎么觉得有个10ng的样子……
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
3楼2012-11-29 14:43:02
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wxlzzzz

新虫 (初入文坛)
25 ng
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你做了什么，什么都没做。
4楼2012-11-29 15:06:26
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by winner00lk at 2012-11-29 13:58:26
目测你的质粒浓度在2~4ng之间，如果确认了大小正确的话。

大小基本正确
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6楼2012-11-29 23:23:01
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Marado at 2012-11-29 14:43:02
我怎么觉得有个10ng的样子……

突然想起来貌似有软件可以分析的，准备下下来试试……
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7楼2012-11-29 23:23:49
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wxlzzzz at 2012-11-29 15:06:26
25 ng

眼神这么好……
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8楼2012-11-29 23:24:07
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dshlove at 2012-11-29 17:03:39
感觉回收后只有10ng左右，连接应该可以的，我曾经5ng成功过，回收试试看看

那你酶连的比例是多少呢？是不是也是PCR产物比质粒亮很多？
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9楼2012-11-29 23:25:12
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by cdkey4567 at 2012-11-29 23:25:12
那你酶连的比例是多少呢？是不是也是PCR产物比质粒亮很多？...

我都是小片段和大片段按照10:1添加的，总体积不超过共转化体系的十分之一，一般都是PCR产物比质粒亮，嘿嘿，你要是酶比较好，可以在切质粒时候，多切点，这样回收后浓度就高了。
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10楼2012-11-30 09:00:46
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