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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 不懂就要问，求大神目测下质粒浓度……
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wxlzzzz

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cdkey4567 at 2012-11-29 23:24:07
眼神这么好……

，乐观估计，最好是nanodrop测下了。
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你做了什么，什么都没做。
11楼2012-11-30 09:04:36
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒大约70ng,如果上样x ul,浓度约为70/x ng/ul .
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为什么
12楼2012-11-30 09:39:16
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by dshlove at 2012-11-30 09:00:46
我都是小片段和大片段按照10:1添加的，总体积不超过共转化体系的十分之一，一般都是PCR产物比质粒亮，嘿嘿，你要是酶比较好，可以在切质粒时候，多切点，这样回收后浓度就高了。...

额……“总体积不超过共转化体系的十分之一”是神马意思……能用数字解释下否？
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13楼2012-11-30 10:37:29
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by wxlzzzz at 2012-11-30 09:04:36
，乐观估计，最好是nanodrop测下了。...

原来如此……
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14楼2012-11-30 10:37:46
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 547star at 2012-11-30 09:39:16
质粒大约70ng,如果上样x ul,浓度约为70/x ng/ul .

有这么多？
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15楼2012-11-30 10:39:02
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ljhzyy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我感觉10-15ng 而且 我是新手 这个跑的都弥散了 切胶回收的话不好切 我觉得应该重新跑 至少应该跑出清晰的一条带 这样有可能杂质多 这是个人意见
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16楼2012-11-30 10:41:20
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
cdkey4567: 金币+1, ★★★很有帮助, 好 2012-11-30 17:48:57
引用回帖:
13楼: Originally posted by cdkey4567 at 2012-11-30 10:37:29
额……“总体积不超过共转化体系的十分之一”是神马意思……能用数字解释下否？...

就是你加入要用50ul的感受态去共转化，insert和vector的体积加起来不要超过5ul。
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17楼2012-11-30 11:26:51
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547star

木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by cdkey4567 at 2012-11-30 10:39:02
有这么多？...

既要看亮度,也要看宽度.即使计算多了,插入片段的比例变高,也没问题.
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为什么
18楼2012-11-30 13:26:47
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by ljhzyy at 2012-11-30 10:41:20
我感觉10-15ng 而且 我是新手 这个跑的都弥散了 切胶回收的话不好切 我觉得应该重新跑 至少应该跑出清晰的一条带 这样有可能杂质多 这是个人意见

好的，谢谢~
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19楼2012-11-30 17:48:09
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cdkey4567

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by dshlove at 2012-11-30 11:26:51
就是你加入要用50ul的感受态去共转化，insert和vector的体积加起来不要超过5ul。...

长见识了，多谢啊~
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20楼2012-11-30 17:48:29
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