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求助！高效液相内标法测含量
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| 想用高效液相色谱法测定一个未知浓度的物质，没有标准品，是用液相制备的，想用咖啡因做内标，应该怎么操作？谢谢大家 |
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【答案】应助回帖
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karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2012-12-22 12:04:18
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同意二楼的的观点，最好还是根据你的样品查查文献，看看都用什么标准品，不能想当然去干，内标的要求挺高： 在所给定的色谱条件下具有一定的化学稳定性； · 在接近所测定物质的保留时间内洗脱下来； · 与两个相邻峰达到基线分离； · 物质特有的校正因子应为已知的或者可测定； · 与待测组分有相近的浓度和类似的保留行为； · 具有较高的纯度。 为了进行大批样品的分析，有时需建立校正曲线。具体操作方法是用待测组分的纯物质配制成不同浓度的标准溶液，然后在等体积的这些标准溶液中分别加入浓度相同的内标物,混合后进行色谱分析。以待测组分的浓度为横坐标，待测组分与内标物峰面积（或峰高）的比率为纵坐标建立标准曲线（或线性方程）。在分析未知样品时，分别加入与绘制标准曲线时同样体积的样品溶液和同样浓度的内标物，用样品与内标物峰面积（或峰高）的比值，在标准曲线上查出被测组分的浓度或用线形方程计算。 |
3楼2012-12-22 07:24:04
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