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qianqian2003

新虫 (初入文坛)

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http://www.bioon.com.cn/protocol/showarticle.asp?newsid=3244

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31楼2012-12-20 22:10:11

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hzjlan

银虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
清风寨: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-21 08:30:39

如果是质粒上的，只能用同一个启动子，又不想做成融合蛋白的话，可以用IRES或2A连接两个蛋白，这样可以表达两个蛋白，但是用IRES，前一个蛋白一定要带终止密码；如果用2A，前一个蛋白一定不能带终止密码，另外，IRES序列有点大，大概500+bp，但用它两个蛋白的表达量差不多，2A相对较小，但是后一个蛋白的表达量比不上前一个，具体差多少不好说。如果做成融合蛋白，可能问题也不大，如果觉得NotI作为linker短的话，可以加上flag，或His6，都比较有利于蛋白自身折叠。希望有帮助！

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32楼2012-12-20 22:51:35

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Renavatio

木虫 (小有名气)

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专业: 基因组学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
清风寨: 金币+3 2012-12-21 08:34:28

建议可以使用2A元件连接这两个基因

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Undefined！

33楼2012-12-21 00:38:30

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连将

木虫 (正式写手)

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祝福楼主一切顺利！

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34楼2012-12-21 01:09:32

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清风寨

银虫 (小有名气)

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专业: 细胞生物学研究中的新方法

引用回帖:

32楼: Originally posted by hzjlan at 2012-12-20 22:51:35
如果是质粒上的，只能用同一个启动子，又不想做成融合蛋白的话，可以用IRES或2A连接两个蛋白，这样可以表达两个蛋白，但是用IRES，前一个蛋白一定要带终止密码；如果用2A，前一个蛋白一定不能带终止密码，另外，IRE ...

2A是两个A碱基么？

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冷风过心变热

35楼2012-12-21 08:33:48

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