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将两个基因串联到启动子下面,两个基因都能表达么?
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清风寨
银虫
(小有名气)
MolEPI: 1
应助: 5
(幼儿园)
金币: 287.8
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红花: 2
帖子: 273
在线: 33.4小时
虫号: 1391365
注册: 2011-09-05
专业: 细胞生物学研究中的新方法
[
求助
]
将两个基因串联到启动子下面,两个基因都能表达么?
想请问各位大侠,如果我将两个基因GFP、neo基因串联到A3启动子下游,两个基因都是完整的阅读框,中间用内切酶Not I酶切连接。下游再加上加尾信号和反向重复序列。这样子GFP和neo两个基因都能表达么?
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冷风过心变热
1楼
2012-12-20 08:43:34
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aofeng860308
木虫
(正式写手)
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红花: 5
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虫号: 938003
注册: 2010-01-06
性别: GG
专业: 环境分析化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
在真核中表达,要同时表达两个基因的话,最好中间加入IRES序列,有了这个就一定可以表达两个基因了!另外,要共表达GFP和其他任何基因,有一个商业载体pIRES2-EGFP可以实现。
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40楼
2012-12-21 18:29:36
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hf2016
金虫
(正式写手)
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帖子: 309
在线: 112.9小时
虫号: 572632
注册: 2008-06-12
性别:
MM
专业: 蛋白质组学
理论上是中间没有终止子可以融合表达
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一切开始于结束之后
2楼
2012-12-20 08:53:54
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zhoufeng1982
木虫
(著名写手)
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散金: 1
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帖子: 2691
在线: 82.6小时
虫号: 1193591
注册: 2011-01-21
专业: 物理化学
知道了啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊
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3楼
2012-12-20 08:57:59
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cicelyzh
铁杆木虫
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虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
清风寨: 金币+10,
★★★
很有帮助
2012-12-20 09:15:03
如果中间没有终止子的话是可以的。有终止密码子的话,两个基因可以串联表达。没有去掉了第一个基因的终止密码子的话形成融合蛋白。
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4楼
2012-12-20 09:10:02
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