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将两个基因串联到启动子下面，两个基因都能表达么？
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| 想请问各位大侠，如果我将两个基因GFP、neo基因串联到A3启动子下游，两个基因都是完整的阅读框，中间用内切酶Not I酶切连接。下游再加上加尾信号和反向重复序列。这样子GFP和neo两个基因都能表达么？ |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
清风寨: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-21 08:30:39
感谢参与，应助指数 +1
清风寨: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-21 08:30:39
| 如果是质粒上的，只能用同一个启动子，又不想做成融合蛋白的话，可以用IRES或2A连接两个蛋白，这样可以表达两个蛋白，但是用IRES，前一个蛋白一定要带终止密码；如果用2A，前一个蛋白一定不能带终止密码，另外，IRES序列有点大，大概500+bp，但用它两个蛋白的表达量差不多，2A相对较小，但是后一个蛋白的表达量比不上前一个，具体差多少不好说。如果做成融合蛋白，可能问题也不大，如果觉得NotI作为linker短的话，可以加上flag，或His6，都比较有利于蛋白自身折叠。希望有帮助！ |
32楼2012-12-20 22:51:35
2楼2012-12-20 08:53:54
zhoufeng1982
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3楼2012-12-20 08:57:59
cicelyzh
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4楼2012-12-20 09:10:02