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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 将两个基因串联到启动子下面，两个基因都能表达么？
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清风寨

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
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8楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-20 09:35:58
如果两个基因都是完整的，蛋白当然有功能啊。...

我猜想也应该没问题，但是你们实验室做过么？
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冷风过心变热
11楼2012-12-20 09:46:30
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清风寨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-12-20 09:37:44
理论来讲是可以表达的，我们实验室将要做这个

版主是哪边实验室的，你们实验室要做这个，那么有没有相关的文献啊？理论上我觉得也行，但是没有证据啊！
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冷风过心变热
12楼2012-12-20 09:47:54
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 清风寨 at 2012-12-20 09:47:54
版主是哪边实验室的，你们实验室要做这个，那么有没有相关的文献啊？理论上我觉得也行，但是没有证据啊！...

这个老板要亲自上阵，还没有轮到我们做呢，给我们讲的大体也就是将蛋白的核苷酸序列串联，然后放到一个密码子下边
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
13楼2012-12-20 09:51:59
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清风寨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-12-20 09:51:59
这个老板要亲自上阵，还没有轮到我们做呢，给我们讲的大体也就是将蛋白的核苷酸序列串联，然后放到一个密码子下边...

听着狠高端啊 还得老板亲自上阵。你们哪边是做那个物种啊，能不能帮我请教一下你们老板。在基因前面还要不要加什么SD序列的。
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冷风过心变热
14楼2012-12-20 10:12:53
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 清风寨 at 2012-12-20 10:12:53
听着狠高端啊 还得老板亲自上阵。你们哪边是做那个物种啊，能不能帮我请教一下你们老板。在基因前面还要不要加什么SD序列的。...

不是啦，我们这方面都比较生疏，所以老板才上阵的，这些东西查文献都会有的吧
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
15楼2012-12-20 10:19:46
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
清风寨: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-20 10:38:04
可以的，就是第一个基因以TAA结尾，然后第二个基因紧接着ATG开始，这样，两个基因就在同一启动子下表达。在很多生物基因组内都是这样的模式。只是分子生物学用酶切的方法很难凑效，上overlapping PCR吧。
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行至水穷处，坐看云起时
16楼2012-12-20 10:30:12
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

就是 『基因一』TA『ATG基因二』，这方面文献应该不少，也可以用Duet之类已经构建好的同时表达的质粒。
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行至水穷处，坐看云起时
17楼2012-12-20 10:33:51
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清风寨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-20 10:33:51
就是 『基因一』TA『ATG基因二』，这方面文献应该不少，也可以用Duet之类已经构建好的同时表达的质粒。

“『基因一』TA『ATG基因二』”这个中间必须只能是TA碱基么？如果用的是酶切位点碱基多几个不行么？ 在原核生物中我知道这种情况很多，但是真核生物中我还不知道，我做的就是真核生物。
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冷风过心变热
18楼2012-12-20 10:37:46
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果回忆一下生物化学里面的内容，核糖体遇到TAA就水解了，这样核糖体就滑落下来，如果后面正好是ATG，那么就可以继续延伸了，所以中间不能（或者尽可能）不出现其它的碱基，否则核糖体就解体了。

植物里面有很多基因是如此构建表达的。
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行至水穷处，坐看云起时
19楼2012-12-20 11:36:06
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清风寨

银虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-20 11:36:06
如果回忆一下生物化学里面的内容，核糖体遇到TAA就水解了，这样核糖体就滑落下来，如果后面正好是ATG，那么就可以继续延伸了，所以中间不能（或者尽可能）不出现其它的碱基，否则核糖体就解体了。

植物里面有很多 ...

可是你还记得一条mRNA上可以结合很多个核糖体同时进行翻译么，那么会不会后面一个基因也结合一个核糖体进行翻译呢？那么照你说的应该是『ATG基因一TAA』『ATG基因二TAA』了，这两个蛋白翻译完后是不是会连在一起啊，对功能会不会有影响啊？
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冷风过心变热
20楼2012-12-20 12:06:23
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