【答案】应助回帖

冷风过心变热

11楼2012-12-20 09:46:30

清风寨

银虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 5 (幼儿园)
金币: 287.8
散金: 3
红花: 2
帖子: 273
在线: 33.4小时
虫号: 1391365
注册: 2011-09-05
专业: 细胞生物学研究中的新方法

引用回帖:

9楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-12-20 09:37:44
理论来讲是可以表达的，我们实验室将要做这个

版主是哪边实验室的，你们实验室要做这个，那么有没有相关的文献啊？理论上我觉得也行，但是没有证据啊！

冷风过心变热

12楼2012-12-20 09:47:54

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

应助: 86 (初中生)
贵宾: 0.932
金币: 9295.7
散金: 2894
红花: 43
沙发: 28
帖子: 4233
在线: 1412.1小时
虫号: 2005883
注册: 2012-09-16
性别: MM
专业: 免疫相关疾病其他科学问题

引用回帖:

12楼: Originally posted by 清风寨 at 2012-12-20 09:47:54
版主是哪边实验室的，你们实验室要做这个，那么有没有相关的文献啊？理论上我觉得也行，但是没有证据啊！...

这个老板要亲自上阵，还没有轮到我们做呢，给我们讲的大体也就是将蛋白的核苷酸序列串联，然后放到一个密码子下边

让复杂的事情变简单，简单的事情更简单

13楼2012-12-20 09:51:59

清风寨

银虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 5 (幼儿园)
金币: 287.8
散金: 3
红花: 2
帖子: 273
在线: 33.4小时
虫号: 1391365
注册: 2011-09-05
专业: 细胞生物学研究中的新方法

引用回帖:

13楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-12-20 09:51:59
这个老板要亲自上阵，还没有轮到我们做呢，给我们讲的大体也就是将蛋白的核苷酸序列串联，然后放到一个密码子下边...

听着狠高端啊还得老板亲自上阵。你们哪边是做那个物种啊，能不能帮我请教一下你们老板。在基因前面还要不要加什么SD序列的。

冷风过心变热

14楼2012-12-20 10:12:53

静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

应助: 86 (初中生)
贵宾: 0.932
金币: 9295.7
散金: 2894
红花: 43
沙发: 28
帖子: 4233
在线: 1412.1小时
虫号: 2005883
注册: 2012-09-16
性别: MM
专业: 免疫相关疾病其他科学问题

引用回帖:

14楼: Originally posted by 清风寨 at 2012-12-20 10:12:53
听着狠高端啊还得老板亲自上阵。你们哪边是做那个物种啊，能不能帮我请教一下你们老板。在基因前面还要不要加什么SD序列的。...

不是啦，我们这方面都比较生疏，所以老板才上阵的，这些东西查文献都会有的吧

让复杂的事情变简单，简单的事情更简单

15楼2012-12-20 10:19:46

pennchem

专家顾问 (正式写手)

专家经验: +21
MolEPI: 1
应助: 297 (大学生)
金币: 10271.7
散金: 65
红花: 28
帖子: 595
在线: 1093.1小时
虫号: 2139205
注册: 2012-11-21
专业: 生物大分子结构与功能
管辖: 生物科学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
清风寨: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-20 10:38:04

可以的，就是第一个基因以TAA结尾，然后第二个基因紧接着ATG开始，这样，两个基因就在同一启动子下表达。在很多生物基因组内都是这样的模式。只是分子生物学用酶切的方法很难凑效，上overlapping PCR吧。

行至水穷处，坐看云起时

16楼2012-12-20 10:30:12

pennchem

专家顾问 (正式写手)

专家经验: +21
MolEPI: 1
应助: 297 (大学生)
金币: 10271.7
散金: 65
红花: 28
帖子: 595
在线: 1093.1小时
虫号: 2139205
注册: 2012-11-21
专业: 生物大分子结构与功能
管辖: 生物科学

【答案】应助回帖

就是『基因一』TA『ATG基因二』，这方面文献应该不少，也可以用Duet之类已经构建好的同时表达的质粒。

行至水穷处，坐看云起时

17楼2012-12-20 10:33:51

清风寨

银虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 5 (幼儿园)
金币: 287.8
散金: 3
红花: 2
帖子: 273
在线: 33.4小时
虫号: 1391365
注册: 2011-09-05
专业: 细胞生物学研究中的新方法

引用回帖:

17楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-20 10:33:51
就是『基因一』TA『ATG基因二』，这方面文献应该不少，也可以用Duet之类已经构建好的同时表达的质粒。

“『基因一』TA『ATG基因二』”这个中间必须只能是TA碱基么？如果用的是酶切位点碱基多几个不行么？在原核生物中我知道这种情况很多，但是真核生物中我还不知道，我做的就是真核生物。

冷风过心变热

18楼2012-12-20 10:37:46

pennchem

专家顾问 (正式写手)

专家经验: +21
MolEPI: 1
应助: 297 (大学生)
金币: 10271.7
散金: 65
红花: 28
帖子: 595
在线: 1093.1小时
虫号: 2139205
注册: 2012-11-21
专业: 生物大分子结构与功能
管辖: 生物科学

【答案】应助回帖

如果回忆一下生物化学里面的内容，核糖体遇到TAA就水解了，这样核糖体就滑落下来，如果后面正好是ATG，那么就可以继续延伸了，所以中间不能（或者尽可能）不出现其它的碱基，否则核糖体就解体了。

植物里面有很多基因是如此构建表达的。

行至水穷处，坐看云起时

19楼2012-12-20 11:36:06

清风寨

银虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 5 (幼儿园)
金币: 287.8
散金: 3
红花: 2
帖子: 273
在线: 33.4小时
虫号: 1391365
注册: 2011-09-05
专业: 细胞生物学研究中的新方法

引用回帖:

19楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-20 11:36:06
如果回忆一下生物化学里面的内容，核糖体遇到TAA就水解了，这样核糖体就滑落下来，如果后面正好是ATG，那么就可以继续延伸了，所以中间不能（或者尽可能）不出现其它的碱基，否则核糖体就解体了。

植物里面有很多 ...

可是你还记得一条mRNA上可以结合很多个核糖体同时进行翻译么，那么会不会后面一个基因也结合一个核糖体进行翻译呢？那么照你说的应该是『ATG基因一TAA』『ATG基因二TAA』了，这两个蛋白翻译完后是不是会连在一起啊，对功能会不会有影响啊？

冷风过心变热

20楼2012-12-20 12:06:23