应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » T-RFLP检测峰值太少
81/1返回列表
查看: 936  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jerryzyy

金虫 (小有名气)

[求助] T-RFLP检测峰值太少

一直在做土壤细菌T-RFLP，但是两次扫描的结果条带数都非常少，第一次是3,4条，第二次多点了但是最多的也只有17条，第一次可能是没有做好避光，而且酶切的条带也不好，但是第二次，避光措施也尽量做好了，酶切的也出来了一条条带了，土壤细菌的种类很多不能最多只有17条带，看文献基本都是40、50  的，不知道哪出问题了，求高手指点！

酶切图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-17 10:37:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerryzyy

金虫 (小有名气)
怎么没有回复的啊，大家帮帮忙啊
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-21 15:48:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用的哪对引物？酶切后就直接送公司测序？pcr后的过程避光了？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
3楼2012-12-21 21:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerryzyy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by j2 at 2012-12-21 21:20:13
用的哪对引物？酶切后就直接送公司测序？pcr后的过程避光了？

用的是27f/1492r，酶切完后直接送公司了，PCR结束后避光保存了，然后进行了PCR胶回收，胶回收的过程没法避光啊，回收完了又避光了，难道是我酶切的不好吗，酶切成上传的图片 那样可以吗
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-23 16:39:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
1949stone: 金币+1, 鼓励交流 尤其是手机党 2012-12-25 09:49:18
切成那样可以了啊，感觉带不少啊，而且量蛮多。你试试不用胶回收，直接纯化酶切看看有多少带。紫外照久了影响很大的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
5楼2012-12-24 18:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerryzyy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by j2 at 2012-12-24 18:51:11
切成那样可以了啊，感觉带不少啊，而且量蛮多。你试试不用胶回收，直接纯化酶切看看有多少带。紫外照久了影响很大的

我的PCR产物有一点点二聚体，所以我就胶回收了，如过PCR产物非常好，直接纯化的话效果会很好吗
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-25 09:38:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vaivaiann

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引物二聚体没关系的，最后删除50bp以下大小的片段就行，没必要切胶回收的，很多英文文献都有介绍的
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-21 11:19:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jerryzyy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by vaivaiann at 2013-01-21 11:19:06
引物二聚体没关系的，最后删除50bp以下大小的片段就行，没必要切胶回收的，很多英文文献都有介绍的

你好，现在我的实验卡住了，酶切成什么样证明酶切好了，是有条带，还是都是弥散的，一般酶切多长时间，能把你的酶切体系和时间告诉我一下吗，我用的是NEB的MspI和HhaI，如果PCR产物不用胶回收和话，酶切时PCR产物你一般都加多少啊。焦急等待中。。。。。。
赞一下 回复此楼
8楼2013-04-01 17:13:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jerryzyy 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-18 6/300 2026-03-18 22:15 by li123456789.
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸！ 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 296求调剂 +5 大口吃饭 身体健 2026-03-13 5/250 2026-03-17 21:05 by 不惑可乐
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭