应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 免疫组化中的问题
61/1返回列表
查看: 1831  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

苦茶暖心

银虫 (小有名气)

[求助] 免疫组化中的问题

大家好，想问下做小鼠脑的冰冻切片时，甲醛固定后蔗糖梯度脱水时，配制蔗糖时感觉30%的蔗糖配制后溶液有点温，可能是蔗糖溶解时放热，想问下用不用把蔗糖溶液放到四度冰箱降温再用，如果直接用的话，会不会增加免疫组化的非特异性染色？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
goon
1楼 2012-12-10 15:15:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenqin

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 不错的回复！ 2012-12-11 21:45:56
苦茶暖心: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-14 10:45:48
从我们做的经验来看，不必进行上述处理。冰冻切片后，晾干，然后用丙酮固定10-15min即可。如果没有时间直接做下去，还可以用塑料袋包好切片盒，置于4度冰箱内，在这样的温度与环境下，抗原不会消失。在做免疫组化时，取出，不必进行枸椽酸缓冲液高温抗原修改复；有时也不必进行tritonX-100进行细胞打孔，做免疫组化后没有出现非特异性染色。
赞一下 回复此楼
志在千里
2楼2012-12-10 19:38:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laoboshihou

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
苦茶暖心: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-14 10:45:36
冰冻切片后，晾干，然后用丙酮固定10-15min即可。在做免疫组化时，取出，不要进行枸椽酸缓冲液高温抗原修改复，加适当浓度的tritonX-100进行细胞打孔，做免疫组化后没有出现非特异性染色。
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-11 09:19:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jq2k

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

对脑的冰冻切片，我们通常用4%的多聚甲醛配30%蔗糖脱水，而多聚甲醛通常是保存在4度或室温，没有楼主所说的现象。如果是做贴片，那切完后用37°烤片1-2h然后进行下一步实验；如果是漂片(我们常用漂片)，则将切片收集于4%多聚甲醛中备用。丙酮或甲醇处理会使切片容易卷曲；至于triton或tween处理与否则视需要而定，对绝大多数抗原是不需要所谓的“打孔”的，对于染不出来的、难染的抗体才考虑增加膜通透性。
造成非特异染色的原因很多。
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-04 08:42:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luckycly88

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jq2k at 2013-01-04 08:42:04
对脑的冰冻切片，我们通常用4%的多聚甲醛配30%蔗糖脱水，而多聚甲醛通常是保存在4度或室温，没有楼主所说的现象。如果是做贴片，那切完后用37°烤片1-2h然后进行下一步实验；如果是漂片(我们常用漂片)，则将切片收集 ...

我想向您请教，在切片前已经固定过了，切的片再放到PFA里有什么作用
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-19 20:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jq2k

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare: 金币+2, 应助指数+1, 谢谢参与 2013-10-21 08:37:25
这也算后固定吧，切片捞片会损伤片子，后固定一下会好点

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2013-10-20 10:16:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 苦茶暖心 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 368化学求调剂 +13 wwwwabcde 2026-04-07 14/700 2026-04-09 14:47 by heaven_jay
[考研] 材料专硕322 +14 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-05 14/700 2026-04-09 13:25 by 5268321
[考研] 一志愿华中农微生物，288分，三年实验经历 +3 代fish 2026-04-09 3/150 2026-04-09 12:20 by 徐良白眉大侠
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 0703调剂 +17 拾玖壹 2026-04-04 19/950 2026-04-09 09:18 by may_新宇
[考研] 320分人工智能调剂 +9 振—TZ 2026-04-03 10/500 2026-04-08 19:56 by 振—TZ
[考研] 273求调剂 +41 麦小叮当 2026-04-06 48/2400 2026-04-08 15:16 by screening
[考研] 326求调剂 +5 9ahye 2026-04-02 6/300 2026-04-07 21:37 by lijunpoly
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 319分085702安全工程求调剂 +6 rious 2026-04-05 6/300 2026-04-07 09:42 by jp9609
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
[考研] 331求调剂 +8 于征yz 2026-04-05 8/400 2026-04-06 00:54 by fmesaito
[考研] 材料与化工306分找调剂 +12 沧海轻舟e 2026-04-03 13/650 2026-04-04 23:45 by lqwchd
[考研] 11408,335分，本科211，求调剂，可转专业 +5 鳄梨大鳄鱼 2026-04-03 5/250 2026-04-04 22:49 by chongya
[考研] 283分求调剂 +7 小聂爱学习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 21:51 by hemengdong
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[考研] 生物学硕341求调剂 +4 你笑起来像云朵 2026-04-03 4/200 2026-04-03 10:32 by macy2011
[考研] 295求调剂 +7 愿旅途永远坦然 2026-04-02 7/350 2026-04-03 08:22 by fangshan711
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭