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请高手帮我看看这张WB图是怎么回事
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ls1988121
新虫
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虫号: 1881878
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[
求助
]
请高手帮我看看这张WB图是怎么回事
三个泳道上的是同样的样品,为什么前两个很模糊,最后一个还两条带。
我的蛋白是200kd,湿转300mA,两个半小时。
一抗是用的说明书推荐的浓度1:500,二抗1:3000。抗体说明书上给的图是显示一条带的。
未命名.jpg
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1楼
2012-12-04 10:46:44
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lugylucy
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虫号: 2049197
注册: 2012-10-08
专业: 临床分子生物学检验
【答案】应助回帖
我之前也杂过一个抗体(是单克隆抗体),说明书也是一条带,我在人的一种细胞上杂的时候是一条带,但在鼠的细胞做的时候是两条带,有时抗体孵育石匠长、浓度大更明显。有没有可能是转膜不均匀导致的。同意楼上的观点,转完膜后可以用丽春红预染一下。
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3楼
2013-08-02 21:03:21
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cicelyzh
铁杆木虫
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(讲师)
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红花: 72
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在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
感觉二抗加多了,背景大。此外,你有没有预染一下转的膜看看转移的质量?
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2楼
2012-12-04 15:03:02
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