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ls1988121

新虫 (初入文坛)

[求助] 请高手帮我看看这张WB图是怎么回事

三个泳道上的是同样的样品，为什么前两个很模糊，最后一个还两条带。
我的蛋白是200kd，湿转300mA，两个半小时。
一抗是用的说明书推荐的浓度1:500，二抗1:3000。抗体说明书上给的图是显示一条带的。

未命名.jpg
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1楼 2012-12-04 10:46:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉二抗加多了，背景大。此外，你有没有预染一下转的膜看看转移的质量？
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2楼2012-12-04 15:03:02
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lugylucy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我之前也杂过一个抗体（是单克隆抗体），说明书也是一条带，我在人的一种细胞上杂的时候是一条带，但在鼠的细胞做的时候是两条带，有时抗体孵育石匠长、浓度大更明显。有没有可能是转膜不均匀导致的。同意楼上的观点，转完膜后可以用丽春红预染一下。
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3楼2013-08-02 21:03:21
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