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葡聚糖凝胶柱被堵了,怎么办?
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hnwjj87
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2012-12-01 13:02:47
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2012-12-04 07:59:56
引用回帖:
7楼
:
Originally posted by
hnwjj87
at 2012-12-03 21:45:21
谢谢 我用的是葡聚糖凝胶G-50 自己装的柱子,上样的时候每次都要过膜吗?我以前都是直接上样,没有过膜,我是分离多肽的,有必要过膜吗?谢谢...
葡聚糖上柱不过滤样品会堵死啊~~我过滤有时候还因为析出而堵塞呢~~
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8楼
2012-12-03 22:07:26
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研究生9113
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直接洗脱算了!重新装柱子
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梦想就是让你感觉到坚持就是幸福的东西
2楼
2012-12-01 14:02:41
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堵了,如果你能找到堵的部分(一般在最上方),把那一段挖去就OK了
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3楼
2012-12-01 15:58:26
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hnwjj87: 回帖置顶
2012-12-04 13:37:11
蛋白堵柱子多是因为上样液体不干净 有蛋白沉淀了 才会发生 首先要保证上样液体澄清 过膜是一定要的 0.2的 或者0.45的都行 这个是预防柱子不被堵住
第二 如果柱子不幸还是堵了 先用0.2M的碱冲 至少冲3倍柱子的体积 再换0.2的酸(盐酸)冲 最后再用冲柱子的缓冲液冲至流出液的pH为中性了 就可以了
如果这个方法还不行 那就只能换填料了
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4楼
2012-12-02 14:21:18
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