24小时热门版块排行榜    

查看: 3170  |  回复: 40

weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 下雨的傍晚 at 2012-11-26 22:02:57
由于当时没有MARKER了,加乙醇的时候能见到絮状沉淀,可是提了两周左右一直都是这样啊!使用CTAB提的枇杷叶DNA,因为后续要做甲基化所以要纯的,但是一会提不好啊!所以帮忙看看啊!...

加乙醇有絮状沉淀说明有DNA,不少,而且片段长度也不算短~
之后溶在水里面还是TE里面?-20还4度保存的?
11楼2012-11-26 22:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-11-26 22:51:01
加乙醇有絮状沉淀说明有DNA,不少,而且片段长度也不算短~
之后溶在水里面还是TE里面?-20还4度保存的?...

TE中溶解的,是4度保存,这是昨天提的结果更差!昨天是加大CTAB裂解液的量为5ml,之前是1ml !帮帮忙啊!

IMG_20121126_165828.jpg

haha
12楼2012-11-27 09:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by jl860822 at 2012-11-26 22:33:58
你的组织怎么保存的?-80比较好点...

有时是新采的,有时是在-20度保持一天或两天的《不过一直都是用的成熟叶片,因为现在没有嫩叶!
haha
13楼2012-11-27 09:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西农种子

木虫 (著名写手)

青虫还是酱爆的好

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-28 13:37:44
CTAB适用于多数的植物。
枇杷叶的成分里是不是多糖之类的很多?你可以搜索比较下多糖多酚类的植物提取方法。一般来说DNA很容易提取的。
实在不行你用试剂盒试试。总的来说我觉得研磨样品是关键,要足够细,但是不能又不能降解。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

快来粉奶牛的围脖~~http://weibo.com/i/zhaoyuan913
14楼2012-11-27 10:49:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by 西农种子 at 2012-11-27 10:49:10
CTAB适用于多数的植物。
枇杷叶的成分里是不是多糖之类的很多?你可以搜索比较下多糖多酚类的植物提取方法。一般来说DNA很容易提取的。
实在不行你用试剂盒试试。总的来说我觉得研磨样品是关键,要足够细,但是不 ...

是的,含糖和酚较多,所以我把CTAB的量加到3%,4%,PVP2%,巯基乙醇2%,研磨这块我没有液氮只能在冰上磨,磨得挺细的了!试剂盒,没试过不过问过人家都说还是CTAB法比较好用。
haha
15楼2012-11-27 11:12:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by 下雨的傍晚 at 2012-11-27 09:21:17
有时是新采的,有时是在-20度保持一天或两天的《不过一直都是用的成熟叶片,因为现在没有嫩叶!...

但是小片段挺多,你试试RNA酶消化一下
16楼2012-11-27 11:46:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hu6704526

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
琵琶是比较难提取的。建议在提取的过程中利用酚氯仿多抽屉两次,最后溶解DNA的时候加RNA37度处理半个小时。
17楼2012-11-27 12:23:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

对了,你无水乙醇弄出絮状沉淀之后,用牙签或者枪头给挑出来到一管70%乙醇里面洗一下?这样可以排除掉很多非DNA的杂质~
18楼2012-11-27 14:24:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-11-27 14:24:04
对了,你无水乙醇弄出絮状沉淀之后,用牙签或者枪头给挑出来到一管70%乙醇里面洗一下?这样可以排除掉很多非DNA的杂质~

好的,试一下!谢谢!
haha
19楼2012-11-27 16:34:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by jl860822 at 2012-11-27 11:46:17
但是小片段挺多,你试试RNA酶消化一下...

我的DNA药保存好久,后续操作还要摸索很久,样品多个,加RNA酶的话会影响DNA的稳定吗?
haha
20楼2012-11-27 16:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 下雨的傍晚 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见