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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为何CTAB法提取的DNA总是断裂？
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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

[求助] 为何CTAB法提取的DNA总是断裂？ 已有1人参与

最近一直提取的植物总DNA总是断裂，使用的是自己配制的溶液，用改良的CTAB法，提取过程已经很小心了，没有剧烈震荡，可是总是提到断裂的DNA 是什么原因呢？下图是我提的DNA 跑的0.8%琼脂糖凝胶电泳！急希望各位虫虫帮忙解答！

IMG_20121123_103631.jpg
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haha
1楼 2012-11-24 17:12:10
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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
14楼: Originally posted by 西农种子 at 2012-11-27 10:49:10
CTAB适用于多数的植物。
枇杷叶的成分里是不是多糖之类的很多？你可以搜索比较下多糖多酚类的植物提取方法。一般来说DNA很容易提取的。
实在不行你用试剂盒试试。总的来说我觉得研磨样品是关键，要足够细，但是不 ...

是的，含糖和酚较多，所以我把CTAB的量加到3%,4%，PVP2%，巯基乙醇2%，研磨这块我没有液氮只能在冰上磨，磨得挺细的了！试剂盒，没试过不过问过人家都说还是CTAB法比较好用。
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haha
15楼2012-11-27 11:12:02
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shuishui007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
??是ＤＮＡ断裂，是????大，ＲＮＡ没消化，太多了。上???是ＤＮＡ，下???分??????的2-3???带是ＲＮＡ，用ＲＮase消化一下就??会有了。???外，ＤＮＡ沉淀???，4000-6000rpm离心??????。
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2楼2012-11-24 20:48:19
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shuishui007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不是DNA断裂，是RNA没消化。上面的一条带是DNA，下面2-3条带是RNA，RNase消化一下就没有了。另外DNA沉淀后用4000-6000rpm离心就可以了。
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下雨的傍晚
3楼2012-11-24 20:52:44
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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by shuishui007 at 2012-11-24 20:52:44
不是DNA断裂，是RNA没消化。上面的一条带是DNA，下面2-3条带是RNA，RNase消化一下就没有了。另外DNA沉淀后用4000-6000rpm离心就可以了。

谢谢，那我加RNA酶是一下！
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haha
4楼2012-11-25 14:12:31
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