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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

[求助] aflp的选扩问题

我做AFLP标记,欲扩如图
可是选扩什么也没有,是怎么回事?
求高手给指点一下

未命名.jpg
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liugs

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
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2楼2012-11-19 08:33:11
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liugs at 2012-11-19 08:33:11
预扩的结果也不好,估计是预扩的模板造成的选扩没有产物!

那可能是哪方面的原因造成的这种结果呢?麻烦你能给分析一下么
3楼2012-11-19 21:04:52
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jingerbaobei

铁虫 (初入文坛)

预扩产物你稀释了多少倍啊?
4楼2012-11-20 20:31:19
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jingerbaobei at 2012-11-20 20:31:19
预扩产物你稀释了多少倍啊?

稀释了40倍,加3ul
5楼2012-11-20 21:35:13
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liugs

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

6楼2012-11-21 07:33:34
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liugs

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

7楼2012-11-21 07:34:06
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by liugs at 2012-11-21 07:34:06
预扩的片段很大,估计是酶切不完全!

是酶的量不够么
Mse I 10 U/μl                 0.3μl
Pst I 20 U/μl                  0.2μl
T4 ligase 350 U/μl             0.5μl
基因组 DNA 100-200 ng/μl    4.0μl
还是时间太短,我用了16小时
8楼2012-11-21 22:41:22
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