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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » aflp的选扩问题
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

[求助] aflp的选扩问题

我做AFLP标记，欲扩如图
可是选扩什么也没有，是怎么回事？
求高手给指点一下

未命名.jpg
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1楼 2012-11-18 22:13:21
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liugs

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2012-11-19 08:33:11
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liugs at 2012-11-19 08:33:11
预扩的结果也不好，估计是预扩的模板造成的选扩没有产物！

那可能是哪方面的原因造成的这种结果呢？麻烦你能给分析一下么
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3楼2012-11-19 21:04:52
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jingerbaobei

铁虫 (初入文坛)
预扩产物你稀释了多少倍啊？
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4楼2012-11-20 20:31:19
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jingerbaobei at 2012-11-20 20:31:19
预扩产物你稀释了多少倍啊？

稀释了40倍，加3ul
赞一下 回复此楼
5楼2012-11-20 21:35:13
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liugs

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
6楼2012-11-21 07:33:34
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liugs

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
7楼2012-11-21 07:34:06
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by liugs at 2012-11-21 07:34:06
预扩的片段很大，估计是酶切不完全！

是酶的量不够么
Mse I 10 U/μl                 0.3μl
Pst I 20 U/μl                  0.2μl
T4 ligase 350 U/μl             0.5μl
基因组 DNA 100-200 ng/μl    4.0μl
还是时间太短，我用了16小时
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8楼2012-11-21 22:41:22
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