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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关AFLP选扩的问题，请高手帮忙~~
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小名阿飞

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】有关AFLP选扩的问题，请高手帮忙~~已有3人参与

AFLP酶切链接预扩经过检测后有弥散带，但是选扩以后跑聚丙烯胶的时候什么也没有~~但是有marker，感觉药品什么的应该是没有问题，不知道在这个过程有什么事特别要注意的不，哪位仁兄知道请帮忙指点一下~ 谢谢
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1楼2010-08-05 15:00:29
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励回答 2010-08-05 20:06:22
预扩弥散什么状态，是500bp最亮，向两边弥散吗？如果不是，那说明效果不好，将酶切连接产物梯度稀释后，做预扩增，如果依然效果不好，那就是酶切和连接的问题。
如果预扩效果不错，主要预扩产物要稀释20-100倍做选扩
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2楼2010-08-05 19:40:15
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小名阿飞

银虫 (初入文坛)
恩  前面的好像都是没有问题  预扩完检测的结果就是100-800bp之间有弥散带 很清晰 预扩产物稀释了20倍做选扩，但是检测的时候除了marker有带，别的就什么也没有。
    请问一下会不是选扩程序 不行呢，我看文献大家的选扩程序好像都是一样的~~
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3楼2010-08-06 08:52:27
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菡萏清湘

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小名阿飞 at 2010-08-06 08:52:27
恩  前面的好像都是没有问题  预扩完检测的结果就是100-800bp之间有弥散带 很清晰 预扩产物稀释了20倍做选扩，但是检测的时候除了marker有带，别的就什么也没有。
    请问一下会不是选扩程序 不行呢，我看文献大家 ...

我也出现了跟你同样的问题，请问你解决了吗
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4楼2013-11-10 13:09:41
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