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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR跑胶成这样。。。请各位大侠帮我看看，坐等回复。。
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ym6104

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
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27楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 09:04:41
不知道楼主的问题有没有解决呢？我前段时间也是一直出现这种情况，我也是试过很多次了，还是找不到原因，综合我试过的实验，我怀疑是引物出现了问题。。。

今天用新设计的引物重新做了一下，这次成功了，十分感谢。。
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41楼2012-11-16 17:27:40
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ym6104

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
28楼: Originally posted by hourl11 at 2012-11-16 09:06:43
我们实验室有人和你出现了同样的情况，最后是重新设计了一对引物，就都好了。最后分析说当时能扩出来后来不行可能是因为模板不同，虽然都是试剂盒提的，但一批一批的还是有区别，能扩出来的那一次运气比较好呗。要不 ...

今天用新设计的引物重新做了一下，这次成功了，十分感谢。。
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42楼2012-11-16 17:27:56
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
40楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-16 17:24:25
问题解决啦，就是引物的问题，重新设计了一对引物，条带很亮，也没有拖尾。...

恭喜楼主！！！那和我的问题一样啦~~~
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keepon
43楼2012-11-16 19:32:37
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
40楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-16 17:24:25
问题解决啦，就是引物的问题，重新设计了一对引物，条带很亮，也没有拖尾。...

根据我的情况我觉得是我的引物发生了突变，楼主你觉得呢？分析一下~~~~
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keepon
44楼2012-11-16 19:34:29
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)
引用回帖:
30楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-16 10:36:25
因为要胶回收，就把25μl都加进去了。。。。也考虑了是不是胶或者电泳跑得不合适，让其他同学帮我带了几个样，他跑的就没事，我的还是这样拖尾。。...

胶回收，你打孔的梳子。
既然是他跑的没有事情，证明还是操作问题，细化一下操作，不要着急。PCR这东西越着急越容易出错。
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45楼2012-11-16 19:34:54
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cmin126

铜虫 (小有名气)
我觉得应该是模板的问题，你直接用琼脂糖跑一下模板，看看模板是不是降解了吧，我以前也遇到过一样的情况。
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46楼2012-11-17 10:47:24
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ym6104

金虫 (小有名气)
引用回帖:
46楼: Originally posted by cmin126 at 2012-11-17 10:47:24
我觉得应该是模板的问题，你直接用琼脂糖跑一下模板，看看模板是不是降解了吧，我以前也遇到过一样的情况。

问题已经解决了，是引物的原因，当时也以为是模板降解，所以重新提了DNA，问题还是一样。。。。
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47楼2012-11-17 12:14:37
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ym6104

金虫 (小有名气)
引用回帖:
44楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 19:34:29
根据我的情况我觉得是我的引物发生了突变，楼主你觉得呢？分析一下~~~~...

我现在对这个问题也百思不得其解，怎么之前就没事呢，而且还让公司重新合成了一对，，，
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48楼2012-11-17 12:15:57
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ym6104

金虫 (小有名气)
引用回帖:
43楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 19:32:37
恭喜楼主！！！那和我的问题一样啦~~~...

O(∩_∩)O谢谢
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49楼2012-11-17 12:16:40
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