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ym6104

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
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27楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 09:04:41
不知道楼主的问题有没有解决呢?我前段时间也是一直出现这种情况,我也是试过很多次了,还是找不到原因,综合我试过的实验,我怀疑是引物出现了问题。。。

今天用新设计的引物重新做了一下,这次成功了,十分感谢。。
41楼2012-11-16 17:27:40
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ym6104

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
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28楼: Originally posted by hourl11 at 2012-11-16 09:06:43
我们实验室有人和你出现了同样的情况,最后是重新设计了一对引物,就都好了。最后分析说当时能扩出来后来不行可能是因为模板不同,虽然都是试剂盒提的,但一批一批的还是有区别,能扩出来的那一次运气比较好呗。要不 ...

今天用新设计的引物重新做了一下,这次成功了,十分感谢。。
42楼2012-11-16 17:27:56
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

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40楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-16 17:24:25
问题解决啦,就是引物的问题,重新设计了一对引物,条带很亮,也没有拖尾。...

恭喜楼主!!!那和我的问题一样啦~~~
keepon
43楼2012-11-16 19:32:37
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

引用回帖:
40楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-16 17:24:25
问题解决啦,就是引物的问题,重新设计了一对引物,条带很亮,也没有拖尾。...

根据我的情况我觉得是我的引物发生了突变,楼主你觉得呢?分析一下~~~~
keepon
44楼2012-11-16 19:34:29
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

引用回帖:
30楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-16 10:36:25
因为要胶回收,就把25μl都加进去了。。。。也考虑了是不是胶或者电泳跑得不合适,让其他同学帮我带了几个样,他跑的就没事,我的还是这样拖尾。。...

胶回收,你打孔的梳子。
既然是他跑的没有事情,证明还是操作问题,细化一下操作,不要着急。PCR这东西越着急越容易出错。
45楼2012-11-16 19:34:54
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cmin126

铜虫 (小有名气)

我觉得应该是模板的问题,你直接用琼脂糖跑一下模板,看看模板是不是降解了吧,我以前也遇到过一样的情况。
46楼2012-11-17 10:47:24
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ym6104

金虫 (小有名气)

引用回帖:
46楼: Originally posted by cmin126 at 2012-11-17 10:47:24
我觉得应该是模板的问题,你直接用琼脂糖跑一下模板,看看模板是不是降解了吧,我以前也遇到过一样的情况。

问题已经解决了,是引物的原因,当时也以为是模板降解,所以重新提了DNA,问题还是一样。。。。
47楼2012-11-17 12:14:37
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ym6104

金虫 (小有名气)

引用回帖:
44楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 19:34:29
根据我的情况我觉得是我的引物发生了突变,楼主你觉得呢?分析一下~~~~...

我现在对这个问题也百思不得其解,怎么之前就没事呢,而且还让公司重新合成了一对,,,
48楼2012-11-17 12:15:57
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ym6104

金虫 (小有名气)

引用回帖:
43楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 19:32:37
恭喜楼主!!!那和我的问题一样啦~~~...

O(∩_∩)O谢谢
49楼2012-11-17 12:16:40
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