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ym6104

金虫 (小有名气)

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25楼: Originally posted by zhixuec at 2012-11-15 22:23:36
从图片看 有目的片段,说明扩增是成功的

但为啥会拖尾呢?而且你的上样孔很亮  那是什么成分?

个人感觉你的体系、酶量都没有问题,感觉像是什么东西污染了一样,考虑下水的问题、buffer
还有就是你EB染色会 ...

是啊,我纠结了很久了。。。。水什么的我都重新灭菌了。。EB染色其他同学都挺好,就我的是这样,哎,都快崩溃了。。。
31楼2012-11-16 10:38:15
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ym6104

金虫 (小有名气)

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26楼: Originally posted by yyll1988 at 2012-11-15 22:53:48
我也出现过这个问题,但是第二次在重复时就没有了,感觉是因为体系没有混匀的原因吧

我都连续一个星期出现这个问题了,哎,郁闷死我了。。。
32楼2012-11-16 10:45:19
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ym6104

金虫 (小有名气)

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27楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 09:04:41
不知道楼主的问题有没有解决呢?我前段时间也是一直出现这种情况,我也是试过很多次了,还是找不到原因,综合我试过的实验,我怀疑是引物出现了问题。。。

问题还在解决中,把所有的东西换过一遍之后,今天我又换新引物了,希望能有好结果啊。
33楼2012-11-16 10:46:24
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ym6104

金虫 (小有名气)

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28楼: Originally posted by hourl11 at 2012-11-16 09:06:43
我们实验室有人和你出现了同样的情况,最后是重新设计了一对引物,就都好了。最后分析说当时能扩出来后来不行可能是因为模板不同,虽然都是试剂盒提的,但一批一批的还是有区别,能扩出来的那一次运气比较好呗。要不 ...

嗯哪,我今天已经换对新引物试试了,但是我用的模版有几个之前都扩出过条带,现在反正都出不来了。。。希望今天能有好结果啊。
34楼2012-11-16 10:47:40
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35楼2012-11-16 11:08:14
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huoyongting

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看图可能模板加多了,还有退火65度是不是有点高了
36楼2012-11-16 11:16:40
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hofo336699

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
条件设置一般不会有什么问题,我看是模版的问题,浓度不对,另外体系混匀也很重要,
懒虫啊!
37楼2012-11-16 11:31:00
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
拖尾现象很严重啊,可以考虑换一下电泳缓冲液
坚持,就像流星,即使知道最后的结果,也要勇敢的走到最后!
38楼2012-11-16 16:10:49
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

引用回帖:
34楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-16 10:47:40
嗯哪,我今天已经换对新引物试试了,但是我用的模版有几个之前都扩出过条带,现在反正都出不来了。。。希望今天能有好结果啊。...

楼主问题解决没有呢?很想知道答案。。。
keepon
39楼2012-11-16 16:38:16
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ym6104

金虫 (小有名气)

ym6104: 回帖置顶 2012-11-17 12:24:20
引用回帖:
39楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-16 16:38:16
楼主问题解决没有呢?很想知道答案。。。...

问题解决啦,就是引物的问题,重新设计了一对引物,条带很亮,也没有拖尾。
40楼2012-11-16 17:24:25
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