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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR跑胶成这样。。。请各位大侠帮我看看，坐等回复。。
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ym6104

金虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 静安jingan at 2012-11-15 20:32:07
这个东西部稳定啊不稳定，我做pcr从来没有稳定过...

现在我也有同感了，做这个还得靠运气。。
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21楼2012-11-15 20:33:33
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
21楼: Originally posted by ym6104 at 2012-11-15 20:33:33
现在我也有同感了，做这个还得靠运气。。...

是啊是啊，不过还是细心点好，师兄从来不失误的，细节决定成败
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
22楼2012-11-15 20:43:05
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q7111988

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ym6104: 金币+2 2012-11-16 10:44:29
电泳仪没出什么问题吧
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Life is a pure flame, and we live by an invisible sun within us.
23楼2012-11-15 21:33:43
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ym6104: 金币+2 2012-11-16 10:44:36
7-1那个一个胶，我看marker都不清晰，有没有考虑过胶配的不好，或者电泳条件不合适。
27 28 29 ，感觉有部分滞留在胶空，是不是上样太多。

PS：这种情况，你可以用实验室其他同学用的比较容易扩出来的模版引物做一次实验，如果也做不出来，才是使用的试剂出了问题。
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24楼2012-11-15 21:50:36
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zhixuec

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ym6104: 金币+2 2012-11-16 10:44:47
从图片看 有目的片段，说明扩增是成功的

但为啥会拖尾呢？而且你的上样孔很亮  那是什么成分？

个人感觉你的体系、酶量都没有问题，感觉像是什么东西污染了一样，考虑下水的问题、buffer
还有就是你EB染色会不会有问题

这个问题很纠结有木有~~
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酷爱の族
25楼2012-11-15 22:23:36
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yyll1988

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ym6104: 金币+2 2012-11-16 10:45:24
我也出现过这个问题，但是第二次在重复时就没有了，感觉是因为体系没有混匀的原因吧
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26楼2012-11-15 22:53:48
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ym6104: 金币+5 2012-11-16 10:46:31
ym6104: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-11-16 17:29:29
不知道楼主的问题有没有解决呢？我前段时间也是一直出现这种情况，我也是试过很多次了，还是找不到原因，综合我试过的实验，我怀疑是引物出现了问题。。。
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ym6104
keepon
27楼2012-11-16 09:04:41
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hourl11

禁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ym6104: 金币+5 2012-11-16 10:47:47
ym6104: 回帖置顶 2012-11-16 17:29:10
ym6104: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-11-16 17:29:38
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ym6104
28楼2012-11-16 09:06:43
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ym6104

金虫 (小有名气)
引用回帖:
23楼: Originally posted by q7111988 at 2012-11-15 21:33:43
电泳仪没出什么问题吧

没有的，实验室其他同学都用讨论，没事。。
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29楼2012-11-16 10:34:35
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ym6104

金虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by 德国工兵铲 at 2012-11-15 21:50:36
7-1那个一个胶，我看marker都不清晰，有没有考虑过胶配的不好，或者电泳条件不合适。
27 28 29 ，感觉有部分滞留在胶空，是不是上样太多。

PS：这种情况，你可以用实验室其他同学用的比较容易扩出来的模版引物做 ...

因为要胶回收，就把25μl都加进去了。。。。也考虑了是不是胶或者电泳跑得不合适，让其他同学帮我带了几个样，他跑的就没事，我的还是这样拖尾。。
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30楼2012-11-16 10:36:25
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