24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1557  |  回复: 17

yaxing2009

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC求助

请教各位:我现在检测的样品用乙腈和水为流动相,在进样之前样品在260nm处能检测到,同一波长处我乙腈和水作为流动相,保留时间在2min左右,接着我又通过降低乙腈比例来调整流动相极性,随着乙腈比例减小样品保留时间越来越大,当保留时间为10min时我停止摸索条件,用甲醇洗柱子,现在问题是我换了甲醇之后,立马有一个很大很尖的峰出现,而且峰型很好,请问这个峰有没有可能是我的样品峰啊,由于本人刚开始接触液相,还请各位前辈多多指教!谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yumulin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有标准品的话的确很难判断究竟是否你需要的峰。
你所提到的尖峰是否是换甲醇冲洗柱子时出的,洗柱子时出现的东西你不需要考虑的。
另外,摸索液相条件,一般都没有这么简单的,你的最后选取的乙腈水比例是多少,是等度的体系么?如果是这样,在你的10分钟后加入一个梯度缓慢升到高比例乙腈80%或90%,通过图谱判断你的样品中到底有多少成分
7楼2012-11-14 23:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

haha_bing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
HPLC随着柱压、流动相的变化都会引起基线的波动,既然你用乙腈和水做流动相,能检测到样品峰,所以换甲醇后出现的峰应该不是样品峰
2楼2012-11-14 16:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能哦,开始摸条件时,时间可以加长点,例如2倍
3楼2012-11-14 16:54:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaxing2009

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by haha_bing at 2012-11-14 16:53:31
HPLC随着柱压、流动相的变化都会引起基线的波动,既然你用乙腈和水做流动相,能检测到样品峰,所以换甲醇后出现的峰应该不是样品峰

我现在有点怀疑之前的那个是不是我的样品峰 因为没有标准品 所以我不确定 唉纠结啊
4楼2012-11-14 16:58:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haha_bing

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yaxing2009 at 2012-11-14 16:58:24
我现在有点怀疑之前的那个是不是我的样品峰 因为没有标准品 所以我不确定 唉纠结啊...

你的样品里有多种物质么?
5楼2012-11-14 20:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaxing2009

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by haha_bing at 2012-11-14 20:12:23
你的样品里有多种物质么?...

我过完柱子的 应该以一个为主 可能会含有少许杂质
6楼2012-11-14 22:07:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaxing2009

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yumulin at 2012-11-14 23:54:24
没有标准品的话的确很难判断究竟是否你需要的峰。
你所提到的尖峰是否是换甲醇冲洗柱子时出的,洗柱子时出现的东西你不需要考虑的。
另外,摸索液相条件,一般都没有这么简单的,你的最后选取的乙腈水比例是多少, ...

是用甲醇冲柱子时出现的峰,我最后确定的乙腈-水的比例为35:65,当水为70时,没有峰出现,乙腈比例我从90%一直试到30%,出峰时间从1左右变到10分多,乙腈30%时没有峰出现,为了确定这个峰是否为样品峰,我又配了一个大浓度的,结果进样后电压明显增大,快要成为平头峰了,请问这样我能确定此峰就是我的样品峰了吗?谢谢!
8楼2012-11-15 10:03:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小狼851226

木虫 (正式写手)

建议做一下液质,判断一下。
9楼2012-11-15 10:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaxing2009

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 小狼851226 at 2012-11-15 10:07:10
建议做一下液质,判断一下。

谢谢 呵呵 就是想摸完条件之后再去做LC-MS
10楼2012-11-15 11:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yaxing2009 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +5 墨彧 yuyu 2026-04-06 5/250 2026-04-06 21:24 by 52305043001
[考研] 0703总分331求调剂 +12 ZY-05 2026-04-04 16/800 2026-04-06 17:54 by lijunpoly
[考研] 085404 293求调剂 +3 勇远库爱314 2026-04-06 3/150 2026-04-06 17:34 by 土木硕士招生
[考研] 生物学求调剂 +5 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-06 11:56 by lijunpoly
[考研] 求调剂 +11 xzghyuj 2026-04-04 11/550 2026-04-06 11:49 by lijunpoly
[考研] 化学调剂求助 +8 LULONG1 2026-04-03 8/400 2026-04-06 10:26 by dongzh2009
[考研] 一志愿北京化工085600 310分求调剂 +16 0856材料与化工3 2026-04-04 18/900 2026-04-06 01:54 by BruceLiu320
[考研] 085500机械专硕初试288求调剂 +3 GZJguo666- 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:06 by jkddd
[考研] 275求调剂 +16 waltzh 2026-04-01 16/800 2026-04-05 17:14 by Hdyxbekcb
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 5/250 2026-04-05 15:52 by jndximd
[考研] 282电子信息0854专硕调剂 +4 202451007219 2026-04-02 6/300 2026-04-04 21:55 by laoshidan
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +6 cs0106 2026-04-03 6/300 2026-04-04 11:20 by w_xuqing
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +9 恬淡ye 2026-03-31 10/500 2026-04-03 11:10 by txp1986
[考研] 求调剂22408 288分 +5 new382 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:13 by 醉在风里
[考研] 【求调剂】新能源材料本科,一志愿211,初试321 +6 求调剂学校, 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕,331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
[硕博家园] 博一被送出联培感觉不适应怎么办 +3 全村的狗 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:44 by 328838485
[考研] 求调剂:一志愿:南京大学 专业:0705 总分320 ,本科985,四六级已过 +3 lfy760306 2026-03-31 3/150 2026-04-01 01:57 by Creta
信息提示
请填处理意见