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yaxing2009

银虫 (小有名气)

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[求助] HPLC求助

请教各位：我现在检测的样品用乙腈和水为流动相，在进样之前样品在260nm处能检测到，同一波长处我乙腈和水作为流动相，保留时间在2min左右，接着我又通过降低乙腈比例来调整流动相极性，随着乙腈比例减小样品保留时间越来越大，当保留时间为10min时我停止摸索条件，用甲醇洗柱子，现在问题是我换了甲醇之后，立马有一个很大很尖的峰出现,而且峰型很好，请问这个峰有没有可能是我的样品峰啊，由于本人刚开始接触液相，还请各位前辈多多指教！谢谢！

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1楼 2012-11-14 16:43:36

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yaxing2009

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

7楼: Originally posted by yumulin at 2012-11-14 23:54:24
没有标准品的话的确很难判断究竟是否你需要的峰。
你所提到的尖峰是否是换甲醇冲洗柱子时出的，洗柱子时出现的东西你不需要考虑的。
另外，摸索液相条件，一般都没有这么简单的，你的最后选取的乙腈水比例是多少， ...

是用甲醇冲柱子时出现的峰，我最后确定的乙腈-水的比例为35:65，当水为70时，没有峰出现，乙腈比例我从90%一直试到30%，出峰时间从1左右变到10分多，乙腈30%时没有峰出现，为了确定这个峰是否为样品峰，我又配了一个大浓度的，结果进样后电压明显增大，快要成为平头峰了，请问这样我能确定此峰就是我的样品峰了吗？谢谢！