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xubang123

金虫 (小有名气)

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[交流] 色谱柱过载，另类解决办法，有经验的进来一起探讨下……

最近做了一个比较特别的项目，和大家探讨下：
分析物特点：1）极性大，在色谱柱中特难保留，2）分子量小， 3）信号响应低
所以好不容易开发了个方法，却发LCMS现响应不够高，进样量从5ul加到10ul色谱柱过载，峰型分叉，信号降低，后来无意中，由中性流动性换成碱性流动性，发现即使进样量达到20ul，峰型也很漂亮，信号也很好。
那么在这里色谱柱过载是什么原因造成的，为什么换成碱性的没问题了？
求高手来探讨下……

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1楼 2012-11-10 22:09:09

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xubang123

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by triger2011 at 2012-11-12 10:08:08
你不说具体用的什么柱子，什么流动相大家就没有办法回答你的问题。
极性大，改用正相柱吧，会好一点。

色谱柱：Phenomenex Gemini C18, 3.0um, 50mm*2.0 mm
起初流动性：A:2mM NH4AC B:0.1%FA in ACN 此刻最多进5ul，
后来变换了流动性：A:0.1%NH3.H20 with 1mM NH4AC in water B:0.1% NH3.H20 in MeoH
此刻可以进样 15ul