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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 质谱分析 » 色谱柱过载，另类解决办法，有经验的进来一起探讨下……
汕头大学海洋科学接受调剂
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xubang123

金虫 (小有名气)

[交流] 色谱柱过载，另类解决办法，有经验的进来一起探讨下……

最近做了一个比较特别的项目，和大家探讨下：
分析物特点：1）极性大，在色谱柱中特难保留，2）分子量小， 3）信号响应低
所以好不容易开发了个方法，却发LCMS现响应不够高，进样量从5ul加到10ul色谱柱过载，峰型分叉，信号降低，后来无意中，由中性流动性换成碱性流动性，发现即使进样量达到20ul，峰型也很漂亮，信号也很好。
那么在这里色谱柱过载是什么原因造成的，为什么换成碱性的没问题了？
求高手来探讨下……
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1楼 2012-11-10 22:09:09
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triger2011

木虫 (正式写手)
★
xubang123(金币+1): 谢谢参与
你不说具体用的什么柱子，什么流动相大家就没有办法回答你的问题。
极性大，改用正相柱吧，会好一点。
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3楼2012-11-12 10:08:08
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xbqewpq

荣誉版主 (著名写手)
★
xubang123(金币+1): 谢谢参与
要看分析物的性质，在酸碱条件下的稳定性。有的就可能不适合。
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4楼2012-11-12 10:13:01
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songzi136

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
xubang123(金币+1): 谢谢参与
xbqewpq: 金币+2, 鼓励交流~ 2012-11-12 20:43:36
分叉不一定就是过载，可能是溶剂效应。把样品溶解于初始流动相中，可以避免这种情况。碱性物质在中性流动相中是以分子和离子状态同时存在的所以可能会出现展宽和分叉的情况，在碱性溶液中是以分子状态存在，至少峰型会比较漂亮。我觉得楼主这种情况应该是溶剂效应，不是超载。
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xubang123
5楼2012-11-12 20:15:48
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xubang123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by triger2011 at 2012-11-12 10:08:08
你不说具体用的什么柱子，什么流动相大家就没有办法回答你的问题。
极性大，改用正相柱吧，会好一点。

色谱柱：Phenomenex Gemini C18, 3.0um, 50mm*2.0 mm
起初流动性：A:2mM NH4AC  B:0.1%FA in ACN  此刻最多进5ul，
后来变换了流动性：A:0.1%NH3.H20 with 1mM NH4AC in water B:0.1% NH3.H20 in MeoH
此刻可以进样 15ul
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6楼2012-11-16 23:41:27
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