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xubang123

金虫 (小有名气)

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[交流] 色谱柱过载，另类解决办法，有经验的进来一起探讨下……

最近做了一个比较特别的项目，和大家探讨下：
分析物特点：1）极性大，在色谱柱中特难保留，2）分子量小， 3）信号响应低
所以好不容易开发了个方法，却发LCMS现响应不够高，进样量从5ul加到10ul色谱柱过载，峰型分叉，信号降低，后来无意中，由中性流动性换成碱性流动性，发现即使进样量达到20ul，峰型也很漂亮，信号也很好。
那么在这里色谱柱过载是什么原因造成的，为什么换成碱性的没问题了？
求高手来探讨下……

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1楼 2012-11-10 22:09:09

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xubang123

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引用回帖:

5楼: Originally posted by songzi136 at 2012-11-12 20:15:48
分叉不一定就是过载，可能是溶剂效应。把样品溶解于初始流动相中，可以避免这种情况。碱性物质在中性流动相中是以分子和离子状态同时存在的所以可能会出现展宽和分叉的情况，在碱性溶液中是以分子状态存在，至少峰型 ...

你说得对，这化合物极性很大，不容易保留，化合物中有机相稍微多些，就会出现前沿拖尾的峰，如果用有机相复溶，确实保留会好些，峰型也不错，这样现象应该是溶剂效应。但有一点不是很明白，后来换了碱性流动性，其他的条件都没改变，为什么峰型就好了了？