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水蓝儿907

新虫 (初入文坛)

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[求助] 蛋白酶的提取

急需！！！想要问大家一下：
               从水产品中提取蛋白酶的方法？
               提取之前是否还需要进行脱脂？脱脂的作用？
               丙酮沉淀法的具体步骤？
               酶活若很低的话如何改进？及低酶活的应用？


   谢谢大家！！！

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想起你，嘴角，只需微微上扬

1楼 2012-10-28 21:25:50

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roydxy

金虫 (小有名气)

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专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

首先细胞破碎，使目的蛋白溶解于缓冲液中
第二步，用硫酸铵，或者有机溶剂（如乙醇、丙酮）等沉淀蛋白——也包括核酸等大分子
第三步，收取沉淀并复溶，用硫酸铵沉淀的需要透析，用有机溶剂沉淀的需初步净化（如硅藻土过滤，微膜过滤等），然后就获得了粗酶。

丙酮现在已不提倡使用的了。乙醇的效果差不多，最好别用丙酮。

提蛋白酶前，我的意见是不用脱脂，否则会导致酶活的降低。

若是酶活很低，有多种情况：如细胞破碎不完全、提取效率低、酶在提取过程中失活等，需要具体情况具体分析

祝：顺利

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2楼2012-10-29 09:20:28

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gezilin1862

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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好多教材上都有关于酶的分离纯化的内容，一般按传统的方法做，至于酶活很低，那是不是要考虑它的浓缩。

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每一天当最后一天。

3楼2012-10-29 17:31:14

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