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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 蛋白酶的提取
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水蓝儿907

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白酶的提取

急需！！！ 想要问大家一下：
                 从水产品中提取蛋白酶的方法？
                 提取之前是否还需要进行脱脂？脱脂的作用？
                 丙酮沉淀法的具体步骤？
                 酶活若很低的话如何改进？及低酶活的应用？
  

     谢谢大家！！！
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1楼 2012-10-28 21:25:50
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roydxy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先细胞破碎，使目的蛋白溶解于缓冲液中
第二步，用硫酸铵，或者有机溶剂（如乙醇、丙酮）等沉淀蛋白——也包括核酸等大分子
第三步，收取沉淀并复溶，用硫酸铵沉淀的需要透析，用有机溶剂沉淀的需初步净化（如硅藻土过滤，微膜过滤等），然后就获得了粗酶。

丙酮现在已不提倡使用的了。乙醇的效果差不多，最好别用丙酮。

提蛋白酶前，我的意见是不用脱脂，否则会导致酶活的降低。

若是酶活很低，有多种情况：如细胞破碎不完全、提取效率低、酶在提取过程中失活等，需要具体情况具体分析

祝：顺利
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-29 09:20:28
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gezilin1862

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
好多教材上都有关于酶的分离纯化的内容，一般按传统的方法做，至于酶活很低，那是不是要考虑它的浓缩。
赞一下 回复此楼
每一天当最后一天。
3楼2012-10-29 17:31:14
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