24小时热门版块排行榜    

查看: 2421  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

[求助] 双抗体夹心ELISA,阳性孔,样品孔和阴性对照全部不显色,怎么回事 已有1人参与

双抗体夹心ELISA,阳性孔,样品孔和阴性对照全部不显色

已经单独用二抗和显色液加一起试过了,显色很明显的,二抗是新换的,二抗和显色液没有问题

操作没有问题的呀,以前做的好好的,这次会不会是因为4度过夜包被的抗体有问题? 这个抗体只在4度放了一个月啊,难道太久失效了吗?(制作抗体的人说不反复冻融,一直在4度可以放几个月没问题的啊)
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunxu7213976

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

把包被的抗体浓度提高,试试看
6楼2012-10-31 12:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

今天又遭遇了这个问题,真的不知道什么原因啊,希望大家讨论一下
3楼2012-10-30 16:56:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lieying18

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-31 08:10:27
双抗体夹心ELISA,阳性孔,样品孔和阴性对照全部不显色
已经单独用二抗和显色液加一起试过了,显色很明显的,二抗是新换的,二抗和显色液没有问题
   根据你的实验结果可以推断,结果没有显色是因为包板的抗体失效,很明显。另外,抗体在4度放几个月没有问题是因为无菌操作的情况下,而且保证冰箱没有任何问题的情况下。另外,可以验证一下你没有包被的抗体,直接点膜做DOT-ELISA,一天肯定出结果。
4楼2012-10-30 17:59:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lieying18 at 2012-10-30 17:59:45
双抗体夹心ELISA,阳性孔,样品孔和阴性对照全部不显色
已经单独用二抗和显色液加一起试过了,显色很明显的,二抗是新换的,二抗和显色液没有问题
   根据你的实验结果可以推断,结果没有显色是因为包板的抗体失效 ...

谢谢,前天换了新的包被抗体,有结果,虽然显色比较浅。可是今天又做的时候,又不显色了,实在不知道是什么原因,包被抗体,一抗和二抗全是新换的了,难道是显色液(自己配的)在4度放太久了吗?
5楼2012-10-30 21:43:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 9/450 2026-11-13 11:02 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:48 by ECLTXnJnRSXf
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:09 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:30 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 11/550 2026-11-12 09:57 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:46 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-12 09:21 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考博] 申请环境,微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
信息提示
请填处理意见