24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1826  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhangyehong

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关疏水层析的问题

求助,我近期从发酵液中分离脂肪酶,过完离子柱后,过疏水层析,用的是GE akta系统,疏水预装柱,洗脱液用的是10%的硫酸铵和磷酸缓冲液,但是上样后,硫酸铵洗出了一个大峰,但是后来用缓冲液洗不下来目的蛋白,因为我的样品有颜色,所以从柱子上看到样品还挂在柱子上,不知道什么原因,想求助一高手,实在没辙了,希望和纯化蛋白的高手交流交流。

[ Last edited by wizardfan on 2012-10-25 at 07:36 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyehong

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yongbo_liang at 2012-10-23 08:24:59
如果没洗脱下来,就说明你的蛋白的极性很弱,那么你就要用极性很弱的溶液来洗脱你的目的蛋白
如果不行的话,说明有可能你的蛋白在柱子上有聚集或沉淀,你也可以尝试加点非极性表面活性剂洗脱一下。

我也想到了这个问题,我用的预装柱是苯基琼脂糖凝胶,结合力最强,我盐析的时候用的是30%的硫酸铵,所以疏水就用10%刚刚出现沉淀时候的浓度洗脱,但还是上完样之后都结合到了柱子上,那是不是再降低硫酸铵的浓度,这样就能减小蛋白和柱子的结合力? 另外你说的非极性表面活性剂都有什么啊?
8楼2012-10-24 20:08:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你蛋白有辅酶或辅基吗?蛋白的颜色是辅酶或辅基的颜色吗?如果没有辅酶,那么换低盐溶液梯度洗脱,或换个低浓度的盐上样,或换个弱一点的疏水柱;如果有辅酶或辅基,那就是辅酶与蛋白分离了。实验顺利。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-10-22 17:03:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用水洗用水洗用水洗用水洗
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-10-22 18:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+3, 鼓励回答 2012-10-30 16:09:22
如果没洗脱下来,就说明你的蛋白的极性很弱,那么你就要用极性很弱的溶液来洗脱你的目的蛋白
如果不行的话,说明有可能你的蛋白在柱子上有聚集或沉淀,你也可以尝试加点非极性表面活性剂洗脱一下。
4楼2012-10-23 08:24:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +10 jhybd 2026-03-23 15/750 2026-03-29 21:49 by nanaliuyun
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +10 芋泥小铃铛 2026-03-28 10/500 2026-03-29 20:51 by 无际的草原
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +8 柳溪边 2026-03-26 8/400 2026-03-29 20:42 by 唐沐儿
[考研] 086000生物与医药调剂 +5 Feisty。 2026-03-28 9/450 2026-03-29 12:02 by longlotian
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 压国家一区线,求导师收留,有恩必谢! +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 0703化学求调剂,各位老师看看我!!! +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 342求调剂 +3 加油a李zs 2026-03-26 3/150 2026-03-27 00:29 by wxiongid
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 一志愿国科过程所081700,274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
信息提示
请填处理意见