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xuyan_1215

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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专业: 生物大分子结构与功能

[求助] α-淀粉酶基因表达问题

各位虫友，本人最近在做α-淀粉酶基因的表达，遇到了如下问题：
(1)表达载体为PET-28a，表达宿主菌为BL21，外源基因已经通过测序验证连接到载体上了，检测酶活是发现，发酵液中有酶活但是胞内没有酶活，这是怎么回事呢？按理说应该是表达在胞内的呀?
(2)空白对照（JM109含有空载体）的发酵液中也有酶活？？？
ps：我都用IPTG诱导的，是不是说明菌种本身就能表达这种淀粉酶呢？
都要愁死了。。。

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1楼2012-10-17 21:22:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

狐狸尾巴

铁虫 (小有名气)

应助: 11 (小学生)
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专业: 生物大分子结构与功能

引用回帖:

4楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-10-18 10:46:13
是否可以分泌到胞外是表达载体决定的还是本身的目的基因决定的呢？Re: 不是载体决定的，是由微生物本身是否有淀粉酶向胞转运系统决定的。
如果像BL21这样的通用型宿主都能表达淀粉酶的话，那我这个基因表达真就没办 ...

载体也可以决定滴