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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 花青素怎么检测不到？
汕头大学海洋科学接受调剂
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tianna5678

银虫 (小有名气)

[求助] 花青素怎么检测不到？ 已有2人参与

某种紫色茶叶中花青素的检测，具体方法：茶叶3.00g，80%的乙醇溶液（均加入体积分数为1%的HCL），按料液比为1：25，提取温度80℃，提取时间 30min进行回流提取，提取液先用纱布过滤，再抽滤得澄清液，洗涤残渣（2-3次）收集合并提取液，定容至250mL，茶汤颜色显蓝紫色，用pH示差法进行检测，可最终结果却与普通茶汤中花青素的含量无异。我觉得没有检测到，到到底问题出在哪里了？请高手指点。不甚感激！
   另，pH示差法的具体方法：取5mL上述供试液，分别用pH值为1.0和pH值为4.5的缓冲溶液定容至10mL．待平衡后(平衡时间1h)在最大吸收波长（波长为535nm,700nm）下测吸光值，计算花色苷含量。
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1楼 2012-10-10 16:37:09
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swallow13

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2012-10-10 16:56:36
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tianna5678

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by swallow13 at 2012-10-10 16:56:36
最终结果与普通茶汤中花青素含量无异 这个是什么意思？是与文献比较还是实验时用了普通茶叶做参比？

实验检测到的花青素的含量与文献中普通茶叶中花青素的含量相差不大。这个茶样别单位检测过，含量是我们的10多倍，只是现在无法知道那个单位是怎么检测的。实验时没有用不同茶叶进行参比，但单纯的从颜色来看差别是很大的。
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3楼2012-10-12 15:15:31
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lq冰果

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
tianna5678: 金币+1, ★有帮助 2013-05-04 11:01:20
花青素颜色随pH值变化，酸性条件下呈红色，碱性条件下呈蓝色。提取花青素都是在弱酸性条件下提取的，不应该是蓝紫色
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4楼2013-05-01 09:26:46
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秋天wei道

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你的缓冲液稀释比例才为1：1，影响缓冲液的PH值，示差结果偏小，稀释比例至少为1:4吧，你可以拿PH计实时的测一下
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5楼2014-04-15 15:22:54
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accn

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

提取应该用酸性溶液，否则花青素不稳定，楼主多看看英文文献吧
提取后溶液需要浓缩，用甲醇等有机溶剂溶解，再用不同pH值的缓冲盐稀释
花青素是有机物，纯水条件不溶，但是有机溶剂是没有pH值的概念的，所以，甲醇溶解，至少要用缓冲液稀释10倍，2倍怎么够？
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6楼2014-04-15 16:40:03
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accn

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

话说楼主的提取液pH值估计都小于1了，加pH4.5的溶液有用吗？
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7楼2014-04-15 16:41:40
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黄筱鱼520

新虫 (初入文坛)
你好，我也在测定花色苷，想请教一下，公式里的稀释体积和稀释倍数怎么带入？我的处理是，1g样品——1：40料液比，提取完毕后定容至100ml，取1ml加9ml缓冲液，测定吸光值。
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8楼2015-09-07 12:40:27
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