24小时热门版块排行榜    

查看: 3689  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nieyaru

新虫 (小有名气)

[求助] 关于western blot SDS电泳时溴芬兰线弥散的问题

我刚做WB,是大鼠肝组织。电泳的时候发现在浓缩胶里面样品压的不是很直,重要的是不像marker压的那样细,而且跑着跑着就会有弥散的现象,样品都跑跑到分离胶了但是marker还没到;电泳条件是浓缩胶50V,分离胶80V;转完我就用考染了一下胶, 发现我的泳道上半节还可以算清楚,下半截就不清晰了  而且连在一起,那位熟手有遇见这种状况给指点下有可能是什么原因呢?是浓缩胶太长了还是电泳时电压太低了?或者是别的原因啊

psb.jpg在浓缩胶里



2.jpg分离胶里
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nieyaru: 金币+3, 有帮助 2012-10-16 16:23:26
可能是跑胶时间天长了
jiayoubashaonian
3楼2012-09-29 09:27:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-29 14:44:00
nieyaru: 金币+8, ★★★很有帮助 2012-10-16 16:23:13
通常会有一点点弥散,如果上样量大的话样品道也不会像marker的那么细。考染下面有问题的话,可以检查一下你的分离胶Tris缓冲液的pH。还有就是配胶的所有溶液配好后最好过滤。浓缩胶太长不会造成扩散,只能使样品浓缩得更好。
2楼2012-09-29 09:08:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nieyaru: 金币+5, 有帮助 2012-10-16 16:23:37
你的胶浓度是多少,蛋白大小又是多少呢?小蛋白高浓度胶,大蛋白低浓度胶。电压嘛 先80 在120 在跑跑看!
生物化学与分子生物学
4楼2012-09-29 16:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieyaru

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2012-09-29 16:05:31
你的胶浓度是多少,蛋白大小又是多少呢?小蛋白高浓度胶,大蛋白低浓度胶。电压嘛 先80 在120 在跑跑看!

不好意思,前些日子没来的及回复,我用的是4%浓缩胶,10%的分离胶,蛋白最大的二百多,最小的36,电压用的是50V ,80V。
5楼2012-10-16 16:22:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +20 koalala 2026-08-24 22/1100 2026-08-24 18:01 by Nano-Firefly
[基金申请] 人气不行了 +9 fansofjerry 2026-08-21 9/450 2026-08-24 17:48 by zhaozhengxin
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +6 图啦图啦 2026-08-24 6/300 2026-08-24 17:44 by 小小红帆
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见