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[交流]
样品蛋白组分SDS-PAGE鉴定有多条带，是否适合阴离子柱纯化之
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20楼2012-09-26 23:34:07
21楼2012-09-26 23:34:56
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meihuayi: 金币+2, 谢谢你的关注，不知道你说的方法效果如何。我们实验室没这么做过，呵呵， 2012-09-27 19:35:11
meihuayi: 金币+2, 谢谢你的关注，不知道你说的方法效果如何。我们实验室没这么做过，呵呵， 2012-09-27 19:35:11
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你Step洗的浓度太大了，介意你将200mM咪唑Elu下来的Desalting成无咪唑的buffer重新过一次His柱，然后介意拉线性洗脱目的蛋白，如果条件有限不能拉线性的话，就把梯度变小，5mM，10mM，20mM,50mM,100mM.200，300，500，这样洗脱，ELU下来的目的蛋白就会比较纯。 这样之后再选取合适的合并过离子交换柱。因为看你的胶图片，有几条杂带离目的带很近，离子交换很难除，His的话或许可以。 你的PI值是6.1，那么阴离子的Buffer用7.5的就可以了，PH太高对蛋白也不好。过离子交换的话，也最好拉线性。 |
23楼2012-09-27 08:54:22
★
meihuayi(金币+1): 谢谢参与
meihuayi(金币+1): 谢谢参与
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本帖内容被屏蔽 |
24楼2012-09-27 12:58:58
简单回复
chenghu5楼
2012-09-26 11:02
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meihuayi(金币+1): 谢谢参与
luckily102210楼
2012-09-26 12:57
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majzh198712楼
2012-09-26 13:07
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liang888713楼
2012-09-26 13:09
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10临药田中华17楼
2012-09-26 17:42
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wizardfan22楼
2012-09-27 06:08
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meihuayi(金币+1): 谢谢参与
